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舌癌细胞迁移过程中RhoA和蛋白激酶A的作用
目的:研究RhoA和蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)在舌癌细胞迁移过程中的作用.方法:采用Boyden趋化小室、细胞黏附试验和划痕法测定细胞的迁移能力,观察RhoA激动剂溶血磷脂酸(1ysophosphatidic acid,LPA)及PKA激动剂cAMP对人舌癌细胞Tca8113的迁移作用.数据以SPSS10.0统计软件包进行t检验.结果:加入1μmol/L LPA和3μmol/L LPA后,细胞迁移数与对照组相比显著增加(P＜0.01),舌癌细胞的迁移能力显著增强.不同浓度LPA组细胞与先用100μmol/L cAMP或200μmol/L cAMP处理后再加入LPA组比较,各组在包被Matrigel或Fn基质表面上的黏附情况存在剂量依赖关系.经cAMP处理后,舌癌细胞在基质表面的黏附显著降低,且随着浓度的增加,其抑制作用更加显著.结论:RhoA的活化可以促进Tca8113细胞的迁移,而cAMP通过激活PKA,抑制LPA引起的RhoA活化,进而抑制细胞的迁移能力.
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基因表达谱芯片技术筛选舌癌转移相关基因
目的应用基因表达谱芯片技术对口腔舌癌细胞系Tca8113及其脑转移细胞株Tb的基因表达谱进行对比分析并筛选差异表达基因,以期从基因水平上探讨舌癌转移机制.方法以舌癌细胞系Tca8113及其脑转移细胞株Tb作为研究肿瘤转移分子机制的模型,提取mRNA,逆转录为cDNA,用Cy3和Cy5荧光染料标记,制备成cDNA探针,与基因表达谱芯片进行杂交扫描和分析;并应用RT-PCR技术对其中6个基因进行验证.结果在1 152个基因表达谱的筛选中,37个基因表达有差异(2倍以上),其中15个基因表达水平上调,22个基因表达水平下调.RT-PCR技术对其中6个基因表达差异的验证结果与基因芯片结果一致.结论舌癌细胞转移侵袭可能与多个基因相关.
