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  • PLAG1转基因小鼠中差异表达长链非编码RNA的筛选分析

    作者:徐万林;刘丽敏;卢浩;杨雯君;沈淑坤

    目的:应用基因芯片技术,筛选PLAG1转基因小鼠下颌下区多形性腺瘤中差异表达的长链非编码RNA(LncRNA).方法:取3对PLAG1转基因小鼠下颌下区多形性腺瘤组织、对侧无瘤腺体组织、空白对照小鼠腺体组织,抽提标本总RNA并反转录合成cDNA探针,与芯片杂交后获得荧光信号,分析在肿瘤组织中差异表达的长链非编码RNA.随机挑选其中5个LncRNA,利用实时荧光定量PCR在6对样本中验证其表达.采用SPSS 13.0软件包中的t检验评价表达差异.结果:基因芯片结果显示,与PLAG1转基因小鼠无瘤腺体组织、空白对照小鼠腺体组织相比,PLAG1转基因小鼠肿瘤中共有5627个LncRNA同时发生差异表达,其中2871个上调、2756个下调.实时荧光定量PCR结果显示,5个随机挑选的LncRNA中,4个(AK146794、ENSMUST00000119440、ENSMUST00000140495、Gm12873)与基因芯片结果一致.结论:应用基因芯片筛选出PLAG1转基因小鼠中差异表达的长链非编码RNA,为进一步研究多形性腺瘤的发病机制提供了依据.

  • p53基因敲除PLAG1转基因小鼠模型构建的研究

    作者:刘丽敏;尚文军;王洋;沈淑坤;杨雯君;王铸钢

    目的:建立p53基因敲除plag1转基因小鼠模型.方法:依托plag1转基因多形性腺瘤小鼠.取两只plag1+母鼠与一只p53+/-雄鼠杂交,分别取F1代中基因型为plag1+p53+/-的雌雄小鼠交配,得到基因型分别为plag1+p53-/-,plag1+p53+/-及plag1+p53+/+的三种多形性腺瘤小鼠,分别测量比较三种基因型多形性腺瘤的生长速度.结果:plag1 +p53-/-基因型小鼠生长迟缓,寿命短,未能长出肿瘤便已死去.plag1 +p53+/-肿瘤生长速度较同龄plag1+p53+/+小鼠相比较快,且有明显的差异(P<0.05).结论:构建了p53基因敲除plag1转基因小鼠模型,且结果显示p53基因与PLAG1基因的相互作用和多形性腺瘤的生长速度增快有关.

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