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血管内皮细胞肿瘤细胞文献资料
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一种新的血管生成抑制因子-TSF的设计及表达
目的选择PF4和TSP1的高活性片段设计融合基因-TSF,在大肠肝菌表达,细胞水平上检测表达产物的生物学活性.方法PF4的C-末端13肽和TSP1的429～459片断31肽通过Gly-Pro-Gly肽桥设计为融合蛋白-TSF.采用pGEX-2T载体在E.coli JM109中表达TSF蛋白.采用MTT方法测定TSF及其相关物GST-TSF、PF4(58-70)、TSP1(429～459)等对血管内皮细胞、平滑肌细胞、QGY7721人肝癌细胞、HLF人肺成纤维细胞等生长的抑制效应.结果合成的TSF融合基因,克隆到pGEX-2T载体,转化E.coli JM109,获得了TSF蛋白的高效表达.建立了TSF蛋白的纯化复性方法,获得了GST-TSF融合蛋白及TSF蛋白.TSF、GST-TSF、PF4(58～70)和TSP1(429～459)均特异抑制血管内皮细胞的生长,其中TSF的活性强,活性大小次序为TSF＞GST-TSF＞PF4(58～70)＞TSP1(429～459).结论融合表达蛋白-TSF在细胞水平上能高效特异抑制血管内皮细胞的生长.
关键词： 血小板因子-4 凝血酶敏感蛋白-1 血管生成 基因表达 血管内皮细胞肿瘤细胞
