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晚期肾癌免疫治疗新进展
肾细胞癌(RCC)是泌尿系统常见的恶性肿瘤,早期可行手术根治性切除,晚期对放化疗均不敏感.随着肿瘤生物治疗的研究,晚期RCC的免疫治疗取得了许多实质性的进展.本文综述近年晚期RCC免疫治疗的临床研究进展.
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冬凌草甲素下调N-乙酰氨基半乳糖转移酶14(pp-GalNAc-T14)表达对肾癌细胞的体外抑制作用
目的 探讨冬凌草甲素下调N-乙酰氨基半乳糖转移酶14( polypeptide N-acetylgalactosaminy-transferase 14,pp-GalNAc-T14)表达对人肾癌细胞的体外抑制作用.方法 收集20例根治性肾癌切除标本的肾癌组织和相对应的癌旁正常组织,用RT-PCR法检测肾癌组织和癌旁正常肾组织中pp-GalNAc-T14 mRNA的表达情况；用单四唑(MTT)法观察冬凌草甲素对该细胞系(786-0人肾透明细胞癌细胞系)的抑制杀伤效果,并运用RT-PCR法检测用药前后pp-GalNAc-T14 mRNA的表达情况.结果 (1)肾癌组织和正常肾组织中pp-GalNAc-T-14 mRNA均有表达,扫描定量显示pp-GalNAc-T14 mRNA的表达在肾癌组织中较正常肾组织高34.91％(P＜0.05).(2)冬凌草甲素作用于786-0细胞后,细胞中pp-GalNAc-T14表达较空白对照组24h下降15.98％、48h下降44.30％、72h下降58.61％,差异均有统计学意义(P＜0.05).(3)冬凌草甲素可以抑制肾癌细胞的增殖,随着冬凌草甲素剂量的增加和作用时间的延长,其抑制细胞增殖作用逐渐增强,呈明显的时间剂量依赖性.16 μmol/L的冬凌草甲素引起的生长抑制明显高于8μmol/L的抑制率(P＜0.05),高可达90％以上.结论 pp-GalNAc-T14通路与肾癌的发生可能有关；冬凌草甲素可以下调O-糖链的起始糖基化转移酶pp-GalNAc-T14的表达,产生抑制肾癌细胞的作用；冬凌草甲素可能成为RCC治疗的新策略.
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肾癌G250/MN/CAIX抗原基因在酿酒酵母中的诱导表达及意义
[目的]观察G250抗原基因编码区cDNA全长基因片段在酿酒酵母中诱导表达情况,并初步探讨其作为肿瘤治疗中的意义.[方法]应用基因重组技术将人G250 cDNA序列克隆入酿酒酵母穿梭诱导表达载体pYES2/NT C,构建重组酵母真核表达质粒pYES2/NT C-G250并转化酿酒酵母菌株INVSc1,筛选阳性克隆转化子,经半乳糖诱导表达后进行菌体全蛋白的Western blot检测.[结果]成功构建pYES2/NT C-G250重组酿酒酵母诱导表达质粒,证实其能够在酿酒酵母中诱导表达,表达量随诱导时间而变化,8～12 h达高峰.[结论]人G250基因片段能够在酿酒酵母中表达,为进一步探讨基因重组酿酒酵母G250疫苗抗肿瘤效应及其安全性打下基础.
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肾癌G250抗原基因在sp2/0细胞中的表达及其意义
[目的] 将G250抗原cDNA片段转染入sp2/0细胞中并获得稳定表达,为G250基因疫苗研究提供实验工具.[方法] 用脂质体转染法将鉴定好的重组质粒转染入sp2/0细胞中.经G418筛选得到稳定表达,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、间接免疫荧光、Western blot检测G250基因在sp2/0细胞中的表达.[结果] 转染2周后,筛选出阳性sp2/0细胞克隆,通过RT-PCR证实有G250mRNA转录,间接免疫荧光可以见到阳性细胞,Western blot证实有G250抗原表达.[结论] 建立了稳定表达G250抗原的肿瘤细胞模型,为研究基于肾癌G250基因的肿瘤基因疫苗治疗奠定了基础.
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Annexin-1在肾细胞癌中的表达
目的:探讨肾细胞癌(renal cell carcinoma tissue,RCC)组织中Annexin-1的表达及意义.方法:应用免疫组织化学方法检测56例肾癌组织、20例癌旁组织和16例肾细胞组织中Annexin-1的表达情况.结果:肾癌组织、癌旁组织和肾细胞组织中Annexin-1的阳性表达率分别为21.43%(12/56)、35%(7/20)和81.25%(13/16).结论:Annexin-1在肾癌组织、癌旁组织中的表达较肾细胞组织中的表达显著降低,检测Annexin-1有望为肾细胞癌的早期诊治提供理论依据.
