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PCP胞外区文献资料
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PCP-2胞外区/Fc融合蛋白的真核表达、纯化及其生物学活性鉴定
目的:构建PCP-2胞外区(PCP-2EC)与人免疫球蛋白IgG Fc融合蛋白表达载体,在哺乳动物细胞中表达并纯化PCP-2EC/Fc蛋白,研究其在神经细胞黏附中发挥的作用.方法:以PBLIISK-PCP-2为模板扩增PCP-2EC片段,定向插入真核表达载体pIGplus;重组质粒分别转染COS-7细胞和293细胞,可溶性表达PCP-2EC/Fc融合蛋白,并通过金葡菌蛋白A特异性纯化;以此融合蛋白作为基质,观察原代培养神经元的黏附情况.结果:成功构建PCP-2EC/Fc融合蛋白表达载体,表达载体的构建与预期设计相符;进一步在哺乳动物细胞中表达并纯化PCP-2EC/Fc蛋白;PCP-2EC/Fc蛋白可以促进原代培养神经元的黏附作用.结论:本研究成功地构建了PCP-2EC/Fc融合蛋白真核表达载体,获得有活性的PCP-2胞外区可溶性分子,初步研究发现其在神经细胞黏附中发挥促进作用,为后续神经及其他领域中的功能研究奠定基础.
