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基于Cre/loxP系统的糖皮质激素受体基因条件性打靶嵌合鼠的获得
目的:应用Cre/loxP系统建立诱导型糖皮质激素受体(GR)基因剔除小鼠模型,为在体内直接进行GR基因的研究提供条件.方法:针对GR基因第2外显子构建诱导型目标载体,将打靶载体电穿孔转染胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES),经Southern杂交筛选发生正确同源重组的ES细胞,囊胚注射法制备嵌合体并进行生殖系检测及纯化建系.结果:成功构建了针对GR基因第2外显子的诱导型目标载体,转染ES细胞获得了工程化的ES细胞,经囊胚注射获得了由工程化的ES细胞和体细胞共同发育而来的嵌合体小鼠.结论:基于Cre/loxP系统的GR基因条件性打靶嵌合鼠的获得,为得到理想的诱导型GR基因剔除小鼠模型奠定了基础.
关键词: 受体 糖皮质激素 嵌和体 Cre/Loxp系统 胚胎干细胞 -
嵌和体水平及供受者基因配型相合程度对小鼠移植物抗宿主病的影响
目的 探讨小鼠半相合、异基因骨髓移植后受体嵌和体水平及供受者基因配型相合程度对小鼠移植物抗宿主病影响.方法 以BALB/C小鼠为受鼠,以CB6F1小鼠为供鼠, A组给予全身照射4.0Gy预处理方案,B组给予全身照射8.0Gy,所有受鼠在第0天经尾静脉注射CB6F1小鼠骨髓细胞细胞悬液(5×106), C组以CB6F1小鼠为供鼠,D组以C57BL/6小鼠为供鼠,均给予全身照射(8.0Gy),观察所有受鼠移植后的嵌合体水平及GVHD的情况.结果 A组形成混合型嵌合体,移植2周达高峰,随后有下降趋势,B、C及D组为完全供者型嵌合体(>90%),且持久稳定;A、B两组间临床GVHD评分有显著差异( P<0.05);D组临床GVHD评分和死亡率明显高于A 、B 及C组(P<0.05).结论 嵌和体水平与移植后GVHD的发生有关;供受者基因配型相合程度对嵌合体水平无影响,但与GVHD的发生有关.