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ATP-结合盒转运子G1文献资料
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AGEs-RAGE相互作用对巨噬细胞胆固醇流出功能影响的研究
目的 观察糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)及其受体(receptor of advanced glycation end products,RAGE)对巨噬细胞胆固醇流出功能的影响.方法 培养THP-1细胞株并用佛波酯诱导分化使其成为巨噬细胞,与100 μg/ml的氧化LDL(oxidized LDL,oxLDL)孵育细胞使其转化为泡沫细胞.分别以浓度为300 μg/ml的AGEs、600 μg/ml的AGEs对细胞进行刺激,用浓度为10μg/ml的抗RAGE抗体对细胞进行预处理,通过油红“O”染色测定来反映细胞内脂质含量,通过RT-PCR及Western Blot的方法来检测各组巨噬细胞RAGE表达以及与胆固醇流出相关因子ATP-结合盒转运子(ATP-binding cassette,ABC)G1、ABCA1及肝X受体-α(Liver XReceptor-α,LXR α的表达变化),通过将干预后的巨噬细胞与荧光标记的oxLDL共同孵育,并加入HDL及载脂蛋白A1(apolipoprotein A1,apoA1)介导胆固醇流出,测定细胞培养基中的荧光强度,动态观察巨噬细胞在不同干预条件下胆固醇流出功能变化.结果 经AGEs诱导后,巨噬细胞内脂质含量增加,RAGE表达增加,ABCG1表达下降,巨噬细胞胆固醇流出能力减弱.AGEs效应呈浓度依赖性.应用抗体阻断RAGE功能后,AGEs引起的改变均有明显恢复.结论 AGEs-RAGE相互作用可以抑制巨噬细胞流出胆固醇,增加细胞内脂质累积,从而易于形成泡沫细胞.
