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neuroplastin65对小鼠神经功能的影响
目的 探讨neuroplastin65对小鼠神经细胞的作用和影响.方法 25～ 30 g SPF C57BL/6野生雄性小鼠4只,同体质量的NP65(-/-)雄性小鼠4只,分为两组,多聚甲醛和生理盐水灌注固定取材,以14 μm冰冻切片.使用尼式染色,对比观察海马神经元的密度.25 ～ 30 g的C57BL/6,野生型雄性小鼠8只,同质量NP65(-/-)雄性小鼠8只,线栓法制备局灶性脑卒中模型,缺血损伤2h后再灌注,7d以后分别取野生小鼠和NP65(-/-)小鼠大脑组织,灌注固定取材,以4μm石蜡切片,尼氏染色观察两组小鼠神经元存活情况以及TUNEL染色观察神经元凋亡情况.结果 NP65(-/-)小鼠海马和皮质神经元与野生小鼠神经元数量无明显差别;敲除组小鼠的神经元的存活数量较野生型小鼠多;TUNEL染色结果显示,野生小鼠神经元的凋亡数量较NP65(-/-)小鼠多.结论 neuroplastin65的敲除对小鼠神经元产生了影响,这可能会导致小鼠某些神经功能的改变.
关键词： neuroplastin65 脑卒中 神经保护 免疫组化 -
Neuroplastin65敲除通过调控中枢5-HT影响小鼠的焦虑样行为
目的:研究neuroplastin65(NP65)敲除对小鼠焦虑样行为的影响并初步探讨其机制.方法:成年NP65敲除(NPD65-/-)小鼠和同基因型背景的野生型(wild type,WT)小鼠,通过Western Blot鉴定NP65-/-小鼠;用旷场实验、探洞实验和埋珠实验检测小鼠的焦虑水平;ELISA检测小鼠海马、前额叶皮质和纹状体谷氨酸和5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)的含量;5-HT合成酶色氨酸羟化酶2(tryptophan hydroxylase 2,TPH2)免疫荧光染色观察小鼠脑干中缝核5-HT能神经元;Western Blot检测小鼠脑干TPH2的蛋白表达.结果:与WT小鼠相比,在旷场实验中,NP65-/-小鼠进入中心区的次数显著减少(P ＜0.001),中心区停留时间显著降低(P ＜0.001),运动总距离和平均运动速度无显著变化.探洞实验中,NP65-/-小鼠探洞次数显著增加(P ＜0.001)、探洞时间增多(P＜0.05)、后肢竖立次数减少(P＜0.01)和排便次数增多(P ＜0.001).埋珠实验中,NP65-/-小鼠掩埋潜伏期延长(P＜0.05),埋珠个数显著减少(P＜0.05).神经递质检测结果显示:NP65-/-小鼠海马、前额叶皮质和纹状体谷氨酸的含量不变,海马5-HT的含量显著减少(P＜0.05),但前额叶皮质和纹状体5-HT的含量没有显著性差异.免疫荧光染色观察到NP65-/-小鼠脑干中缝核TPH2阳性细胞数目显著减少(P＜0.05).Western Blot分析显示:NP65-/-小鼠脑干TPH2的蛋白表达量显著降低(P＜0.05).结论:NP65敲除导致小鼠表现出显著的焦虑样行为,可能与脑干中缝核TPH2表达减少而导致海马5-HT含量降低有关.
关键词： Neuroplastin neuroplastin65 焦虑 敲除 5-HT 中缝核 小鼠
