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缺氧微环境中CCL28高表达促进HCCLM3细胞迁移和侵袭
目的 探讨缺氧条件下HCCLM3细胞趋化因子CCL28表达情况及作用.方法 实时定量PCR和ELISA方法检测缺氧条件下肝癌细胞HCCLM3趋化因子CCL28表达水平;运用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)和Lipofectamine 2 000细胞转染技术下调CCL28表达;用Transwell和Matrigel观察肝癌细胞HCCLM3侵袭迁移情况;采用明胶酶谱法测定CCL28-siRNA干扰后细胞上清中的基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinase enzyme,MMP)含量.应用实时定量PCR检测50例肝细胞癌组织中CCL28 mRNA表达情况,运用卡方检验和Kaplan-Meier法分析CCL28表达与临床病例特征及患者总体生存时间的关系.结果 肝癌HCCLM3细胞内CCL28 mRNA在缺氧培养6h后表达增高,蛋白水平在缺氧培养12 h后表达增高,呈时间依赖性.SiRNA抑制CCL28表达后,缺氧条件下HCCLM3细胞迁移数目(65.2±4.49)较siRNA阴性组(85±5.91)和空白组(87.4±8.44)有所减少(P＜0.001);穿过Matrigel膜细胞数目(43.2±5.36)较siRNA阴性组(58±3.87)和对照组(54.6±9.53)有所减少(P=0.011).明胶酶谱法发现CCL28表达抑制后HCCLM3分泌MMP-2减少.PCR结果提示,肝癌组织CCL28 mRNA表达量为0.0254±0.0755,与正常肝组织相比,23例(46％)呈高表达,CCL28表达高低与肿瘤大径(P=0.027)、术后复发相关(P=0.019);CCL28高表达与低表达组之间总体生存无明显差异(x2=0.008,P=0.927).结论 缺氧条件下趋化因子CCL28高表达并参与肝癌细胞HCCLM3迁移侵袭过程.肝癌组织中CCL28表达增高与术后复发相关.
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CCL27 CCL28及 CCR10在癫痫小鼠急性期表达增高
目的：探讨趋化因子 CCL27、CCL28及其受体 CCR10在小鼠癫痫急性期外周血中的表达变化。方法取正常及癫痫小鼠急性期不同时间点(10 min、30 min、1 h、2 h)外周血利用实时荧光定量 PCR(Real-time PCR)法检测毛果云香碱致癫痫发作小鼠急性期外周血中 CCL27、CCL28 mRNA 水平；同期取正常及癫痫急性期不同时间点(10 min、30 min、1 h、2 h)肝素抗凝外周血，提取淋巴细胞层后利用 FACSsort 型流式细胞仪检测外周血淋巴细胞 CCR10蛋白水平的表达变化。结果癫痫小鼠发作急性期外周血中 CCL27、CCL28 mRNA 水平、淋巴细胞中 CCR10蛋白表达水平均在癫痫发作2 h 高于对照组(P <0.05)。结论癫痫发作早期已出现外周血免疫功能紊乱，该病理变化可能与癫痫发病过程中的炎性反应和神经细胞的凋亡相关。
