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联合氟达拉滨和环磷酰胺的预处理减轻急性移植物抗宿主病的实验研究
目的 探讨联合氟达拉滨与环磷酰胺的预处理对过继性淋巴细胞植活和急性移植物抗宿主病程度的影响.方法 受鼠为8～10周雌性BALB/C小鼠,供鼠为8～10周雄性BALB/C×C57BL/6→F1小鼠.根据预处理方式的不同将受鼠分为5组(n=12):联合应用氟达拉滨和环磷酰胺组、单用氟达拉滨组、单用环磷酰胺组、全身照射组以及空白对照组即应用生理盐水组.预处理结束后第2天过继性植入5×107个供鼠脾细胞,检测供鼠脾淋巴细胞在受鼠外周血中的嵌合率,观察生存时间、急性移植物抗宿主病临床表现.结果 联合应用氟达拉滨和环磷酰胺组小鼠的脾淋巴细胞嵌合率与全身照射组相似,急性移植物抗宿主病的临床表现明显减轻(P<0.05).结论 联合应用氟达拉滨和环磷酰胺能够促进过继性同种异基因淋巴细胞植活,可减轻急性移植物抗宿主病.
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过继性同种异基因淋巴细胞植入小鼠模型的建立
目的 建立同种异基因淋巴细胞过继性植入的小鼠模型,探讨诱导稳定的同种异基因淋巴细胞嵌合体的方法.方法 受鼠为雌性BALB/C,预处理为137Se全身照射(TBI)5Gy,分为A、B、C、D、E共5组(n=12),分别过继性植入雄性C57BL/6N脾淋巴细胞5×107、1×107和雄性BALB/C×C57BL/6→F1脾淋巴细胞0.5×107、1×107、5×107(个/只).对存活时间超过21 d的受鼠在不同时间点用聚合酶链反应(PCR)检测供者淋巴细胞嵌合体,观察受鼠生存时间和急性GVHD的症状.结果 TBI为5Gy的免疫抑制后,在受鼠保留自身造血的情况下,过继性同种异基因淋巴细胞可以植活.MHC分子半相合的植活率(D组)比完全不相合的(B组)高,植活时间长(P＜0.01);在半相合的植入模型中植入的细胞量越多,植活率越高,植活时间逐渐延长(P＜0.05).同时仍有急性GVHD发生,MHC完全不相合(A组)移植小鼠可发生致死性急性GVHD,半相合(E组)急性GVHD明显减轻(P＜0.01).结论 TBI为5Gy的免疫抑制后同种异基因淋巴细胞的过继性植入可以显著增加嵌合体阳性比例,并且保留受鼠自身造血.缩小供受者MHC分子的差异,适当增加供者淋巴细胞的数量对获得稳定的同种异基因淋巴细胞嵌合体以及避免致死性急性GVHD出现具有实际意义.
