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雌激素受体ERα36基因敲低影响PC12细胞分化相关蛋白的表达
ERα36作为一种新近鉴定出的雌激素受体亚型,广泛表达在多种组织、细胞中,参与肿瘤细胞的生长、增殖、分化过程,但其在神经系统中的表达及其功能尚不明确.本文以PC12高分化(PC12D)细胞和PC12未分化(PC 12unD)细胞为研究对象,利用ERα36-shRNA质粒转染细胞建立ERα36敲低细胞模型(PC12D-36L,PC 12unD-36L),通过免疫细胞荧光法、Westemblot观察神经干细胞特征标志蛋白Nestin、β-微管蛋白Ⅲ (β-tubulinⅢ)和神经特异性核蛋白Neu-N的表达变化.结果显示,PC12D和PC12unD细胞内均有ERα36的表达;与PC12D细胞相比,PC 12unD细胞中Nestin表达较高,β-tubulinⅢ表达较低.敲低ERα36可降低PC12unD细胞的Nestin的表达水平,而升高β-tubulinⅢ和Neu-N的表达水平;敲低ERα36对PC12D细胞的上述三种蛋白的调节作用则相反.以上结果表明,敲低ERα36可抑制高分化细胞分化,促使未分化细胞分化,提示ERα36可能参与神经细胞分化的双重调控作用.
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雌激素受体ERα36在子宫内膜癌组织中表达及临床意义的初步研究
目的:分析新型雌激素受体ERα36在子宫内膜癌组织中的表达与临床病理特征的关系.方法:免疫组织化学方法检测73例子宫内膜癌、20例正常子宫内膜、9例不典型增生子宫内膜组织切片ERα36的表达,并分析其与临床病理特征间的关系.结果:ERα36在子宫内膜癌组织中阳性表达率(32.9%,24/73)显著低于正常子宫内膜组织(85%,17/20)(P<0.01);ERα36阴性表达者较阳性表达者出现更多宫颈受侵(48.9%VS20.8%,P<0.05):ERα36阳性表达者无疾病生存时间短于阴性表达者(P<0.01);ERα36表达与患者年龄、临床分期、组织学分级、肌层浸润、淋巴结转移和病理类型的差异无统计学意义(P>0.05);ERα36表达与ER、PR、PTEN、p53无显著相关性(P>0.05).结论:ERα36在子宫内膜癌组织的表达明显低于正常子宫内膜组织;ERα36表达与ER无明显相关性,可能是子宫内膜癌预后的一个指标.
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雌激素受体ERα36基因沉默对PC12细胞生长相关蛋白表达的影响
目的 通过检测新型雌激素受体(ERα36)基因沉默后PC12高分化细胞中生长相关蛋白的表达,探讨ERα36对PC12细胞生长增殖的影响.方法 利用ERα36-shRNA质粒转染细胞建立ERα36基因沉默细胞模型(PC12-36L1,PC12-36L2),免疫细胞荧光法检测ERα36的表达,Western blot检测PC12细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)和丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)等生长相关蛋白的表达变化.结果 ①三个细胞株PC12-36C1(转染空质粒)、PC 12-36L1和PC12-36L2中均有ERα36表达;与PC12-36C1、PC12-36L2细胞相比(OD值分别为:0.95±0.05,0.78±0.10),PC12-36L1细胞内ERα36表达显著降低(OD值:0.47±0.12,P＜0.01).②与PC12和PC12-36C1细胞相比,PC12-36L1细胞中PCNA、CyclinD1和p-MAPK的表达都显著升高(P＜0.01)[PCNA、CyclinD1和p-MAPK的OD值:PC12细胞分别为(1.00±0.05,1.00± 0.11,1.00±0.05),PC12-36C1细胞分别为(1.09±0.15,0.92±0.23,1.12±0.08),PC12-36L1细胞分别为(1.74±0.12,2.20±0.25,1.77±0.06)].结论 ERα36基因沉默可促进PC12细胞的生长增殖.结果提示ERα36低表达可能与脑瘤等神经系统疾病有关.
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17β-雌二醇可促进胃癌细胞BGC823生长
目的:观察不同浓度17β-雌二醇(E2β)处理时,人胃癌BGC823细胞生长情况以及雌激素受体ERα36表达的变化,探讨E2 β在胃癌生长调节中的作用及相关机制.方法:BGC823细胞经10-10,10-11和10-12 mol/L浓度的E2β处理24 h和48 h.细胞生长通过WST1方法检测.RT-PCR,Western blot及灰度分析法检测ERα36mRNA水平及蛋白水平变化,其平均光密度值通过t检验分析,应用免疫荧光染色方法检测ERα36蛋白在细胞中的位置变化.结果:E2β可促进胃癌BGC823细胞生长,但随着其浓度的上升,E2β的促生长能力下降.E2β可促进ERα36 mRNA表达,该促进作用具有浓度依赖性.E2β处理BGC823细胞24 h时,ERα36蛋白表达上升,48 h时,ERα36蛋白表达下降.ERα36蛋白定位于细胞膜,E2β对BGC823细胞ERα36蛋白定位无明显影响.结论:E2β可促进胃癌细胞BGC823生长.E2β-ERα36可能通过膜信号通路参与了胃癌细胞的生长调节.
