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gH基因型文献资料
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实时荧光PCR检测人巨细胞病毒糖蛋白H基因分型
目的 利用实时荧光PCR技术建立一种快速、灵敏而特异的检测巨细胞病毒(HCMV)糖蛋白H基因(gH)分型的方法.方法 针对HCMV gH基因的保守区域和分型区域,设计一对保守引物及其相应gH分型的TaqMan探针.实时荧光PCR技术检测HCMV标准株AD169(gH1型)与TOWNE(gH2型),进行特异性及灵敏度评价.另对112例确诊HCMV感染患儿的尿液标本DNA进行检测,再随机选取gH1、gH2基因型PCR扩增阳性产物各4例进行测序验证.结果 建立的实时荧光PCR可以特异识别HCMV标准株的gH分型,且检测灵敏度达102 CFU/mL.112例尿液标本中86例为gH1型HCMV感染,25例gH2型HCMV感染,1例为HCMV gH基因两种型别混合感染.8株临床分离样本测序结果显示,gH基因和标准株相比保守性>95%.结论 本研究建立的实时荧光PCR方法快速、特异,适用于HCMV gH基因分型的临床检测.