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miR-20a-5p/miR-20b-5p在胃癌细胞和组织中的表达及调控靶基因信号通路富集分析
目的 观察miR-20a-5 p/miR-20b-5p在胃癌细胞和胃癌组织中的表达,并用生物信息学方法分析其靶基因和富集的信号通路,探讨其生物学行为和功能.方法 采用实时荧光定量PCR法检测miR-20a-5 p/miR-20b-5p在不同分化程度(高、中、低)的胃癌细胞和正常胃黏膜细胞以及其在胃癌组织和癌旁组织中的表达水平,并分析其临床意义,采用mirWALK网站数据库的预测软件预测其靶基因,选择该网站10个软件中具备3个以上软件支持的靶基因,用DAVID 6.7在线富集其靶基因参与的信号通路.结果 miR-20a-5 p/miR-20b-5p在不同分化程度(高、中、低)的胃癌细胞中表达上调(P均＜0.05),胃癌组织相对于癌旁组织亦明显上调表达(P＜0.05),miR-20b-5p表达上调与胃癌淋巴结侵袭转移以及浸润深度关系密切(P均＜0.05);生物信息学分析提示,miR-20a-5 p/miR-20b-5p的靶基因富集存在于肿瘤相关的多个信号通路中.结论 miR-20a-5p/miR-20b-5p在胃癌细胞系及组织中呈高表达,并于与淋巴结侵袭转移以及浸润深度有关,可作为胃癌潜在的生物学标志物.
关键词： miR-20a-5p miR-20b-5p 胃癌 -
miR-20a-5p在胰腺癌中的表达及作用机制研究
目的 检测并分析胰腺癌组织和胰腺癌细胞株中miR-20a-5p的表达情况及对胰腺癌细胞发生、发展的影响.方法 收集16对手术切除胰腺癌患者的癌组织及对应癌旁组织、5种胰腺癌细胞株及1株正常胰腺导管上皮细胞,通过实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative realtime polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测临床标本及胰腺癌细胞株中miR-20a-5p的表达水平;通过转染miR-20a-5p mimics及miR-20a-5p inhibitor分别上调及下调胰腺癌细胞(AsPC-1、BxPC-3)中miR-20a-5p的表达水平,采用CCK-8、EdU及流式凋亡实验检测过表达及敲低miR-20a-5p后对胰腺癌细胞活力、增殖及凋亡能力的影响.结果 胰腺癌组织中miR-20a-5p的表达量显著高于癌旁组织(P<0.01),5种胰腺癌细胞系中miR-20a-5p的表达量较正常胰腺细胞也明显升高(P<0.05).CCK-8及EdU实验结果显示,过表达miR-20a-5p促进胰腺癌细胞增殖能力,反之,干扰miR-20a-5p抑制胰腺癌细胞增殖.凋亡检测结果显示,过表达miR-20a-5p抑制胰腺癌细胞凋亡能力,反之,干扰miR-20a-5p促进胰腺癌细胞凋亡.结论 胰腺癌组织和胰腺癌细胞系均高表达miR-20a-5p,上调miR-20a-5p能促进胰腺癌细胞增殖及抗凋亡能力.
关键词： miR-20a-5p 胰腺癌 增殖 凋亡 -
miR-17-5p、miR-17-3p和miR-20a-5p在胃间质瘤中表达
目的 探讨miR-17-5p、miR-17-3p及miR-20a-5p在胃间质瘤(gastric stromal tumor,GST)中的差异表达及其与临床病理因素的关系.方法 提取正常胃组织及GST组织共72例标本的总RNA,应用Real time RT-PCR方法检测miR-17-5p、miR-17-3p及miR-20a-5p的表达,用SPSS 19.O分析其与临床病理因素的关系及3个miRNA间的相关性.结果 在GST中,miR-17-3p、miR-17-5p在肿瘤组织中表达较胃正常组织低(P ＜0.001),但是在低危组和中高危组GST中表达差异无统计学意义(P＞0.05);miR-20a-5p表达在胃正常组织、低危组和中高危组之间均有差异表达,且随着恶性度的增加而下降(P＜0.001),3种miRNA的表达水平与肿瘤的侵袭、转移、年龄、肿瘤大直径和核分裂象密切相关,而与瘤体是否破溃无关.结论 miR-17-5p、miR-17-3p、miR-20a-5p在GST中下调并相互作用可能是促进GST发生、发展因素之一.
