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复式PCR文献资料
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复式PCR检测间日疟原虫和恶性疟原虫的现场应用
目的 探讨复式PCR方法在疟疾诊断中的现场应用价值.方法 根据疟原虫18 S rRNA基因序列,合成疟原虫属特异性上游引物和间日疟原虫、恶性疟原虫种特异性下游引物,优化PCR反应体系,建立在同一PCR反应体系中同时检测间日疟原虫、恶性疟原虫基因组特异性DNA片段的疟疾诊断方法,并评价其现场应用价值.结果 间日疟原虫和恶性疟原虫基因组DNA经过复式PCR后,分别扩增出1 451 bp和833 bp的特异性条带,而伯氏疟原虫、食蟹猴疟原虫及健康人血样均无扩增带出现,用该反应体系可检出原虫血症为1.1×10-6和5.6× 10-7的间日疟原虫和恶性疟原虫感染.与镜检法相比,复式PCR检测119份现场样本,112份与镜检结果相同,阳性率为54％,漏诊率为0.8％,误诊率为0,而镜检法依次分别为53％、1.7％和3.4％.结论 复式PCR方法检测疟原虫具有简便、快速、特异、敏感等优点,在疑似病例的鉴别诊断和分子流行病学调查中具有良好的应用价值.
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复式PCR用于闽南疟疾监测的效果评价
目的 评价复式PCR在闽南疟疾监测中的应用效果。方法采集流行区发热病人及疫点居民血样用复式PCR一次扩增同时检测恶性疟原虫(P.f)和间日疟原虫(P.v)。结果249例发热病人PCR测阳性率为8.02％，敏感性为100％，特异性99.56％符合率99.59％，镜检阳性率为7.63％，抽查疫点居民701人检测疟原虫，未发现阳性样本，复式PCR检测大批样本平均费用不高于传统镜检方法。结论该复式PCR检测系统用于闽南现场疟疾监测具有敏感、特异、快速等特点，可用于分子流行病学调查、防治效果考核及虫种鉴别等。
