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瑞芬太尼对人结肠癌COLO205细胞增殖及凋亡的影响
目的 探讨瑞芬太尼对人结肠癌COLO205细胞增殖及凋亡的影响.方法 体外培养人结肠癌细胞COLO205,按完全随机法分为两组:正常对照组和瑞芬太尼干预组.四甲基偶氮唑盐(monotetrazolium,MTT)法检测瑞芬太尼在相同浓度的条件下不同时间点对结肠癌COLO205细胞增殖的影响,测得抑制率并计算半数抑制浓度值,应用凋亡试剂盒结合流式细胞仪检测瑞芬太尼对人结肠癌COLO205细胞凋亡的影响.结果 MTT结果显示,相同浓度的瑞芬太尼干预结肠癌COLO205细胞,分别在24、48、72 h测算半数抑制浓度结果为(50.6±4.0)、(43.6±3.7)、(36.0±1.1)nmol/L;瑞芬太尼干预组凋亡率为(59±9)%,对照组凋亡率为(71±15)%.结论 瑞芬太尼能抑制结肠癌COLO205细胞增殖,促进其凋亡.
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PIAS3在结肠癌组织和细胞中的表达及意义
[目的]观察PIAS3在结肠癌组织及细胞中的表达,探讨PIAS3在结肠癌发生发展中的作用.[方法]采用免疫组织化学染色法检测60例结肠癌及同源癌旁组织中PIAS3蛋白的表达,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blot检测人结肠癌SW480 、SW620及CO-LO205细胞株中PIAS3 mRNA及蛋白表达水平.[结果]结肠癌组织中PIAS3蛋白表达显著高于癌旁正常组织(x2=8.543,P=0.006);且表达强度随肿瘤病理分化程度的降低、Dukes分期的增高及肿瘤体积的增大而逐渐增高,差异有统计学意义(P均＜0.05);PIAS3在结肠癌SW480、SW620及COLO205细胞株中均有表达,其中COLO205细胞株中PIAS3蛋白及mR-NA表达高于SW480和SW620细胞株(P＜0.05).[结论]PIAS3的表达水平以及活性与结肠癌的发生发展有关,可能为结肠癌的早期诊断及靶向治疗提供新的分子靶点.
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无血清培养的大肠癌Colo205细胞生成肿瘤干细胞球的研究
目的 通过含生长因子的无血清培养基(SFM)培养大肠癌Colo205细胞,分离并扩增出肿瘤干细胞球.方法 SFM培养大肠癌Colo205细胞,以含血清培养基(SSM)组为对照.观察细胞形态,检测正常肠道干细胞标志Musashi-1的表达,更换培养基为SSM诱导其分化,分别检测SFM组细胞分化前、分化后以及SSM组细胞表面标志CDl33、CD44表达的改变,分析各细胞周期的比例,后进行核型分析.结果 Colo205细胞能在SFM中存活、增殖并形成肿瘤干细胞球,高表达Musashi-1,SFM组细胞分化前CD133、CD44的表达高于SSM组和SFM组分化后,差异有统计学意义(P＜0.05),SFM组分化后与SSM组相比差异无统计学意义(P＞0.05).细胞周期分析发现肿瘤干细胞球处于高增殖状态,核型分析发现SFM组细胞与SSM组细胞染色体条数未见明显差别.结论 含生长因子的SFM培养Colo205细胞,可生成肿瘤干细胞球,这种细胞球富集了肿瘤干细胞.
