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大鼠睾丸纤维化模型的建立
目的: 建立大鼠睾丸纤维化模型,为进一步研究睾丸纤维化的发病机制打下良好基础. 方法: 将Wistar大鼠分为正常组(12只)和模型组(40只),采用制造自身免疫性睾丸炎的经典方法结合单侧睾丸内注射卡介苗,建立睾丸纤维化模型. 结果: 距第1次免疫80 d时,自身免疫性睾丸炎的发生率为100%,睾丸纤维化的发生率为11.1%;距第1次免疫140 d时,自身免疫性睾丸炎的发生率为100%,睾丸纤维化的发生率为81.5%. 结论: 成功地建立了大鼠睾丸纤维化模型.
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原癌基因 c- kit mRNA在自身免疫性睾丸炎中的表达及意义
[目的]探讨原癌基因c-kit mRNA在自身免疫性睾丸炎中的表达及意义.[方法]建立并分析自身免疫性睾丸炎动物模型:42只BALB/c小鼠随机分为6个实验组和1个对照组.6个实验组小鼠分别给予KM小鼠睾丸混悬液皮下注射,每周1次多者4次,在第1次给予抗原注射后1,2,3,4,6,8周各取一组小鼠的睾丸组织,用RT-PCR检测其c-kit mRNA的变化.[结果]在第1次给予抗原注射后第1周开始c-kitm RNA转录水平开始降低,第2周起明显低于对照组(P＜0.05),至第3,4周降至低,第6周逐渐开始恢复,至第8周其水平与对照组相比差异已经没有统计学意义(P＞0.05).[结论]c-kit基因与生精功能密切相关,c-kit基因mRNA的低表达可能参与自身免疫性睾丸炎导致不育的发病机制.
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BALB/c鼠自身免疫性睾丸炎动物模型的制作
[目的]探讨BALB/c鼠睾丸炎动物模型的建立方法,观察睾丸炎形成后到生殖功能恢复的时间间隔,以及该动物模型的稳定性.[方法]BALB/c小鼠(10周)背脊皮下注射睾丸混悬液0.1 mL,浓度2×107/mL,1次/周,共4次.同种睾丸混悬液(组1)、同种睾丸混悬液加完全免疫佐剂(组2)、异种睾丸混悬液(组3)、异种睾丸混悬液加完全免疫佐剂(组4)、空白对照(组5).[结果]组3建模成功率80%,第5、8、11周按Johusen评分为5.2±1.44、6.2±0.79、8.1±0.87,组1、2、5评分均在9.0以上,组3生精功能明显降低(P＜0.05).组4小鼠于第2次注射后3～5 d,全部死亡.组3第5周生精上皮细胞减少至2～3层,曲细精管管腔中有稀疏的精子,间质出现水肿,淋巴细胞浸润约10%～25%.第5周组3附睾尾精子浓度为(11.0±6.2)×106,精子存活率(10.73±8.14)%,精子活动率(7.3±6.1)%,明显低于组1、2、5(P＜0.05),于第11周组3恢复至正常水平.睾丸炎生精障碍持续21～28 d.[结论]异种小鼠生殖细胞可诱导建立BALB/c小鼠的EAO模型,模型有一定的持续稳定性,可用于精子发育生物学研究.
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椒蒿挥发油对小鼠自身免疫性睾丸炎的影响
目的 研究椒蒿挥发油对小鼠自身免疫性睾丸炎睾丸组织结构及血清抑制素B和卵泡刺激素含量的影响.方法 健康成年雄性BALB/c小鼠150只,随机分为生理盐水组、模型组及椒蒿低、中、高剂量组(即椒蒿挥发油的体积分数为0.938%、1.875%、3.375%),采用单侧睾丸注射冰醋酸的方法造模.各组都在造模前3d开始灌胃,手术并单侧睾丸注射冰醋酸后继续灌胃,连续灌胃24d后,分别于术后3周、6周、9周取材检测,光镜观察非手术侧睾丸生精小管内的变化,ELISA法检测血清抑制素B和卵泡刺激素的变化情况.结果 术后3、6、9周,模型组及椒蒿低、中剂量组血清抑制素B含量均低于生理盐水组,差异有统计学意义(P<0.05),卵泡刺激素含量均高于生理盐水组,差异有统计学意义(P<0.05),术后9周,椒蒿高剂量组血清抑制素B和卵泡刺激素含量与生理盐水组比较,差异无统计学意义(P>0.05),术后9周,椒蒿高剂量组光镜下睾丸组织结构基本正常.结论 椒蒿挥发油对小鼠自身免疫性睾丸炎的发生有一定的拮抗作用,同时也跟剂量有关,高剂量组的拮抗效果好,术后灌胃9周,睾丸组织结构基本恢复正常.
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椒蒿对自身免疫性睾丸炎小鼠CD4+CD25+调节性T细胞的影响
目的 研究椒蒿挥发油对自身免疫性睾丸炎小鼠CD4+ CD25+调节性T细胞的影响.方法 雄性BALB/c小鼠80只,随机分为4组(生理盐水组、模型组、橄榄油组、椒蒿组),采用睾丸内注射冰醋酸的方法造模,各组都在手术前3天开始灌胃,手术后继续灌胃,共连续灌胃24 d(盐水组只灌胃,不手术).分别于术后3周、9周取外周血,通过流式细胞仪对CD4+ CD25+调节性T细胞进行检测.结果 术后3周,模型组、橄榄油组、椒蒿组小鼠外周血CD4+ CD25+调节性T细胞百分比均低于生理盐水组,差异有统计学意义(P＜0.05),而此3组之间差异无统计学意义(P＞0.05).术后9周模型组与橄榄油组小鼠外周血CD4+ CD25+调节性T细胞百分比低于生理盐水组,差异有统计学意义(P＜0.0S),椒蒿组与生理盐水组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 椒蒿能使自身免疫性睾丸炎小鼠CD4+ CD25+调节性T细胞百分比提高,后者可发挥免疫调节作用.
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抗氧化剂与钙离子拮抗剂合用防治大鼠免疫性睾丸炎的实验研究
目的:研究抗氧化剂与钙离子拮抗剂联合应用对大鼠免疫性睾丸炎的防治作用及其作用机制.方法:Wistar大鼠随机分为正常对照组、预防免疫性睾丸炎症组(预防组)和免疫性睾丸炎症模型组(模型组),从第一次免疫的次日起,预防组每天给予90 mg/kg维生素E、C合剂(Vit C : Vit E=2:1)和50 mg/kg维拉帕米灌胃,共80d,模型组未给予干预措施,正常对照组未加任何处理.检测3组的精子计数、精子畸形率、皋丸重量、曲细精管直径,光镜观察皋丸间质及曲细精管生精细胞的变化.结果:预防组与正常对照组的精子计数、精子畸形率、皋丸重量和曲细精管直径差异均无统计学意义(P＞0.05),镜下表现接近于正常对照组.模型组与正常对照组相比,精子计数、睾丸重量和曲细精管内径均有明显减少(P＜0.05～0.01),精子畸形率明显增加(P＜0.01).光镜下睾丸间质明显充血,生精细胞脱落,生精上皮空泡变,多核巨精细胞形成,不同程度的炎性细胞浸润.结论:维生素E、维生素C、维拉帕米联合应用可明显减轻大鼠免疫性炎症损伤.
