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Chk1/2基因表达对精子浓度和活力的影响
目的:研究精子中细胞周期检测点激酶1/2(Chk1和Chk2)基因的表达对精子浓度及活力的影响.方法:将精液样本根据精子浓度和活力(前向运动精子百分率)分为正常对照组、少精子症组、弱精子症组和少弱精子症组,每组20例.分别检测各组精子DNA碎片指数(DFI)、精子存活率,采用RT-PCR和Western印迹方法分别检测各组精子Chk1、Chk2的表达. 结果:①4组DFI分别为21.24±6.93、19.67±7.64、21.52±6.92、19.28 ±11.55,无显著差异(P＞0.05);4组精子存活率分别为(83.48 ±9.87)％、(63.86 ±9.16)％、(50.45±16.99)％、(39.21±15.74％),与正常对照组相比,其余3组均有显著下降(P均＜0.05);②DFI＞ 30％和DFI≤30％两组精子的浓度、活力和精子存活率之间的差异有统计学意义(P＜0.01);③RT-PCR检测结果显示,4组Chk1 mRNA相对表达量分别为0.73 ±0.22、0.62 ±0.14、1.03 ±0.39、0.92 ±0.071,各组间比较差异有显著性(P＜0.01),其与精子浓度呈正相关(b =80.661,P＜0.01),与精子活力呈负相关(b=-19.275,P＜0.01);4组Chk2mRNA相对表达量分别为0.66±0.30、0.27±0.09、0.59±0.19、0.42 ±0.11,各组间比较差异有显著性(P＜0.01),其与精子浓度呈负相关(b=-90.809,P＜0.01),与精子活力呈正相关(b=27.507,P＜0.01).④Western印迹结果显示,4组Chk1蛋白相对表达量分别为0.63 ±0.05、0.42 ±0.03、1.13 ±0.08、0.87 ±0.07,各组间比较差异有显著性(P＜ 0.01),其与精子浓度呈正相关(b=55.74,P＜0.01),与精子活力呈负相关(b=-22.649,P＜0.01);4组Chk2蛋白相对表达量分别为1.23 ±0.36、0.37±0.16、0.87 ±0.08、0.68 ±0.12,各组间比较差异有显著性(P＜0.01),其与精子浓度呈负相关(b=-53.001,P＜0.01),与精子活力呈正相关(b=16.676,P＜0.01).结论:Chk1和Chk2在人类精子中均有显著表达,在精子DNA出现损伤后,Chk1表达的增强可能促进了精子的凋亡导致弱精子症,而Chk2表达的增强则可能抑制了精子的生成而导致少精子症.
关键词： 细胞周期检测点激酶1/2 精子浓度 精子活力 精子DNA碎片指数
