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长链非编码RNA GAS5调节喉癌细胞生物学行为的实验研究
目的 探讨长链非编码RNA GAS5(lncRNA GAS5)对喉癌Hep2细胞增殖和凋亡的影响及可能机制.方法采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测喉癌和癌旁正常组织中GAS5的表达,分析其表达与喉癌临床病理特征的关系. Hep2细胞中分别转染pcDNA3. 1?GAS5或siGAS5,另分别转染pcDNA3. 1?NC或siNC作对照. MTT法检测转染后Hep2细胞增殖活性,流式细胞术检测Hep2细胞周期和凋亡,QPCR法和Western blotting法检测E2F1、BTF3 mRNA和蛋白的表达.结果 喉癌组织和癌旁正常组织中GAS5 表达水平分别为0. 56±0. 10和0. 98±0. 11,差异有统计学意义(P＜0. 05). GAS5表达与分化程度、TNM分期有关. pcDNA3. 1?GAS5组24、48 、72 、96 h Hep2细胞存活率明显低于pcDNA3. 1?NC组,差异有统计学意义(P＜0. 05);siGAS5组细胞存活率明显高于 siNC组,差异有统计学意义(P＜0. 05). pcDNA3. 1?GAS5 组细胞 G1期细胞比例为(68. 14±4. 33)%,高于pcDNA3. 1?NC组,差异有统计学意义(P＜0. 05). pcDNA3. 1?GAS组凋亡率高于pcDNA3. 1?NC组,差异有统计学意义(P＜0. 05). pcDNA3. 1?GAS5组细胞E2F1、BTF3 mRNA和蛋白的水平均低于pcDNA3. 1?NC组,差异具有统计学意义(P＜0. 05);siGAS5组细胞E2F1、BTF3 mRNA和蛋白的水平均高于siNC组,差异具有统计学意义( P＜0. 05).结论GAS5可负性调控E2F1和BTF3表达,从而参与调控喉癌细胞的增殖和凋亡.
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通用转录因子3在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义
目的 检测食管鳞状细胞癌中通用转录因子3(BTF3)的表达,并探讨其临床意义.方法 收集85例食管鳞状细胞癌和15例正常组织,免疫组织化学检测BTF3蛋白表达,并分析其与临床资料的相关性.结果BTF3在食管鳞状细胞癌中较正常组织升高(62％比0％;P＜0.01);在低分化食管鳞状细胞癌中的表达高于高分化鳞状细胞癌(79％比54％,P＜0.05);BTF3表达强度在肿瘤Ⅲ和Ⅳ期明显高于Ⅰ和Ⅱ期(74％比46％,P＜0.01).结论BTF3在食管鳞状细胞癌的发生、发展中起重要作用.通过对该基因的检测,可以为食管鳞癌患者的治疗和预后提供一定的参考依据.
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通用转录因子3对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响
目的:检测通用转录因子3(BTF3)在卵巢癌生长增殖中的作用,探讨其作为治疗靶点的可行性.方法:构建shBTF3慢病毒载体后转染人卵巢癌SKOV3细胞,采用细胞成像仪检测细胞生长状况,流式细胞术检测细胞周期及凋亡率,MTT法检测慢病毒转染后SKOV3细胞增殖状态的改变.结果:shBTF3慢病毒载体成功转染SK-OV3细胞后,与对照组相比,实验组细胞生长状况下降,增殖减慢.SKOV3细胞周期G1期被抑制,细胞凋亡率升高(P＜0.05).结论:BTF3对卵巢癌细胞SKOV3的生长增殖具有促进作用,考虑BTF3基因在卵巢癌中的表达可能与其发生发展及分级分期密切相关.
