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女贞子及其单体促进小鼠成黑素细胞迁移的研究
目的 体外研究女贞子及其单体酪醇、齐敦果酸对小鼠成黑素细胞系NCCmelb4M5迁移的影响.方法 培养小鼠成黑素细胞NCCmelb4M5,用MTT法检测中药对成黑素细胞增殖的影响,应用细胞划痕实验和Transwell小室迁移实验分析中药对成黑素细胞迁移的作用.结果 0.125 mg/mL组女贞子、0.08 mg/mL组酪醇以及0.0625 mg/mL组齐敦果酸无明显细胞毒性且不明显刺激细胞的增殖,选择工作浓度作用于NCCmelb4M5细胞,女贞子和酪醇作用组可明显促进细胞划痕的愈合.Transwell实验中成黑素细胞穿膜数也显著增加(P<0.05).而齐敦果酸对成黑素细胞的迁移无明显刺激作用.结论 女贞子可明显刺激小鼠成黑素细胞迁移,酪醇可能是女贞子促进成黑素细胞迁移的有效成分之一.
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人表皮成黑素细胞培养条件的初步探讨
目的 探讨人包皮组织来源成黑素细胞的培养条件.方法 包皮取自小儿,采用分离酶和胰酶两步消化法获得表皮细胞悬液,用实验室改进的成黑素细胞培养基培养结合差速黏附法分选成黑素细胞.对培养的成黑素细胞生长情况进行对比观察,并用Dopa染色、TRP2抗体染色、S-100抗体染色以及电镜观察等方法对培养的成黑素细胞进行鉴定.结果 培养的人黑素细胞呈火柴棒状,散在排列,_双极对称,胞体瘦小,细胞核折光性强,TRP2抗体染色、S-100抗体染色、Dopa染色均阳性,电镜下可见胞内含有Ⅲ一Ⅳ期的成熟黑素颗粒.与黑素细胞相比,培养的人成黑素细胞胞浆丰富,体积较大,呈双极或不规则形,克隆样生长,胞内无Ⅲ~Ⅳ期的成熟黑素颗粒,只含有Ⅰ期不成熟黑素颗粒,TRF2抗体染色阳性、S-100抗体染色、Dopa染色阴性.结论 改良的成黑素细胞培养基成功培养出包皮组织来源的成黑素细胞,为表皮色素形成机制的研究打下基础.