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疱疹2型文献资料
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TOPO定向克隆和表达Ⅱ型单纯疱疹病毒gG基因的免疫优势表位片段
目的通过基因工程技术,克隆和表达Ⅱ型单纯疱疹病毒gG基因的免疫优势表位片段.方法以PCR法扩增HSV-2的gG基因的免疫优势表位片段;将PCR产物与TOPO定向表达载体连接;然后鉴定含有目的基因的重组表达载体;并转化BL21StarTM菌株诱导表达目的蛋白;以免疫印迹法检测表达的目的蛋白.结果PCR法扩增出616 bp的DNA片段;通过PCR法及测序法证实重组质粒中含有616 bp的DNA片段,其中99.5%序列与目的基因序列一致.SDS-PAGE结果显示重组蛋白在3 h时的表达产量高.免疫印迹法通过抗gG的单克隆抗体,证实重组蛋白在大肠杆菌中的表达.结论Ⅱ型单纯疱疹病毒的gG免疫优势表位基因片段的成功表达,为制备国产的HSV-2血清诊断试剂提供资料.
