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磺胺二甲基嘧啶完全抗原的合成和鉴定
比较小分子药物磺胺二甲基嘧啶(SM2)用两种不同方法合成完全抗原的免疫效果,通过比较这两种不同方法合成的完全抗原的免疫效果,为进一步的SM2单克隆抗体的制备和SM2残留检测奠定基础.分别采用重氮化(直接连接)、戊二醛法(引入间隔臂)将药物磺胺二甲基嘧啶(SM2)偶联到牛血清白蛋白(BSA)上,并用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定完全抗原合成,确定其偶联比,然后用合成的完全抗原免疫小鼠,免疫周期结束后眼眶取血,用酶联免疫分析法测定血清效价,比较两种不同方法合成的完全抗原的免疫效果.通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定,重氮化法和戊二醛法都成功合成了磺胺二甲基嘧啶(SM2-BSA)完全抗原,偶联比分别为13.6∶1和12.6∶1.通过小鼠血清的酶联免疫分析法检测,进一步证明实验成功合成了SM2完全抗原,并能有效的刺激机体产生良好的免疫反应.
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紫外分光光度法测定盐酸地卡因注射液的含量
盐酸地卡因注射液含量测定方法为制剂规范收载的重氮化法(1),该法操作繁琐,反应较慢,对于本院制剂的中间体控制不太适宜.作者采用紫外分光光度法,在310.5nm处进行测定,结果比较满意,现报道如下.
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氯霉素-BSA和氯霉素-OVA偶联物的制备与鉴定
目的: 制备氯霉素(CAP)-牛血清白蛋白(BSA)及氯霉素(CAP)-卵清白蛋白(OVA)的偶联物并进行鉴定.方法: 分别采用混合酸酐法和重氮化法制备CAP-BSA及CAP-OVA的偶联物, 前者是将CAP先与琥珀酸酐反应生成CAP-半琥珀酸酯(CAP-HS), 再进行混合酸酐反应.将反应产物CAP-HS与BSA结合, 合成CAP-HS-BSA偶联物; 后者是将CAP分子中的苯环上的硝基还原为氨基后,进行重氮化处理, 然后分别与BSA和OVA连接, 合成CAP-BSA和CAP-OVA复合物.结果: 紫外图谱分析表明, CAP-BSA、CAP-OVA和CAP-HS-BSA的紫外大吸收峰分别是262 nm、213 nm 和275 nm; 计算得CAP与载体蛋白BSA、OVA及HS的偶联比分别为5∶1、12∶1和22∶1.结论: 成功的制备CAP-BSA及CAP-OVA的偶联物,为免疫动物制备抗CAP的抗体奠定了基础.
