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氯霉素(CAP)文献资料
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氯霉素-BSA和氯霉素-OVA偶联物的制备与鉴定
目的: 制备氯霉素(CAP)-牛血清白蛋白(BSA)及氯霉素(CAP)-卵清白蛋白(OVA)的偶联物并进行鉴定.方法: 分别采用混合酸酐法和重氮化法制备CAP-BSA及CAP-OVA的偶联物, 前者是将CAP先与琥珀酸酐反应生成CAP-半琥珀酸酯(CAP-HS), 再进行混合酸酐反应.将反应产物CAP-HS与BSA结合, 合成CAP-HS-BSA偶联物; 后者是将CAP分子中的苯环上的硝基还原为氨基后,进行重氮化处理, 然后分别与BSA和OVA连接, 合成CAP-BSA和CAP-OVA复合物.结果: 紫外图谱分析表明, CAP-BSA、CAP-OVA和CAP-HS-BSA的紫外大吸收峰分别是262 nm、213 nm 和275 nm; 计算得CAP与载体蛋白BSA、OVA及HS的偶联比分别为5∶1、12∶1和22∶1.结论: 成功的制备CAP-BSA及CAP-OVA的偶联物,为免疫动物制备抗CAP的抗体奠定了基础.
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氯霉素酶联免疫分析方法的建立
以兔抗氯霉素多抗为包被抗体,氯霉素(CAP)辣根过氧化物酶连接物为标记物,四甲基联苯胺(TMB)为显色底物,建立了氯霉素直接竞争酶联免疫分析(CAP-EIA)方法.本方法灵敏度为0.046 μg /L,批内变异系数＜10%,批间变异系数＜24%,回收率62%～145%.用牛奶样品预处理所得上清液为稀释液做得稀释实验,相关方程为y=3.988x-0.234, 相关系数为0.999.标准曲线范围为0.1～10 μg /L.
