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肝素粗品文献资料
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荧光定量PCR鉴定肝素粗品种属来源质控方法研究
研究了基于荧光定量PCR方法的肝素粗品种属来源质控方法,用于肝素药品生产企业的原料验收质量控制.该方法采用实时定量PCR法,针对猪、牛、绵羊、山羊基因组特有的基因序列设计引物与探针,采用聚合酶链式反应对目标基因进行扩增,利用扩增曲线的Ct值绘制标准曲线,通过未知样品的Ct值对未知样品初始模板中的基因进行定量.测定时通过肝素酶处理肝素原料,以消除肝素介导的PCR抑制效应.结果:该方法在本实验室条件下具有较好的专属性、准确度、精密度和耐用性:猪基因在30 ～0.06 ng/μL范围内呈良好线性,牛、绵羊、山羊基因在0.6 ～0.000 3 ng/μL范围内呈良好线性;猪基因的定量限为0.001 ng/ μL,牛、绵羊、山羊基因的定量限为0.000 3 ng/μL.本质控方法较基因组纯化试剂盒提纯方法具有保证被检基因的真实性、原始性、完整性等优点.
