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谷胱甘肽双功能酶文献资料
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谷胱甘肽双功能合成酶的克隆表达、酶学性质及其应用的研究
谷胱甘肽是广泛存在于生物体内的生物活性三肽化合物,因其具有重要的生理功能而在医药、食品、化妆品等行业有着广泛的应用,该研究克隆了来自Listeria monocytogenes的谷胱甘肽双功能酶基因gshF,以pET28a(+)作为表达载体,利用大肠杆菌实现重组表达,研究表明,重组菌于37℃培养4h后,在28℃下经0.2 mmol/L IPTG诱导表达,胞内酶活可达2 318 U/L.表达产物破胞、离心、亲和层析后,进一步考察了其酶学性质,表明该酶催化适温度37℃,适pH 8.5,还研究了Mg2+和ATP对其的影响以及该酶的稳定性.终通过GshF体外酶催化合成谷胱甘肽,得到的高产量为2.58 g/L.这些对该酶在谷胱甘肽生物合成上的应用有重要的借鉴作用.
