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TaqMan探针技术文献资料
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CYP1A2*1F基因多态性的检测方法建立及其对阿戈美拉汀药代动力学的影响
建立实时荧光定量PCR方法检测CYP1A2* 1F基因多态性,并探讨CYP1A2*1F基因多态性对阿戈美拉汀药代动力学的影响.该方法采用扩增阻滞突变系统(ARMS)结合TaqMan探针技术(ARMS-TaqMan法)同时检测野生和突变两个反应体系,根据野生引物循环阈值(Ctw)与突变引物循环阈值(Ctm)的差值绝对值(ACt)来判断CYP1A2* 1F的基因型.同时进行口服阿戈美拉汀片25mg的药代动力学试验,采用液相色谱-串联质谱法测定血浆中阿戈美拉汀浓度,采用WinNonlin 6.3软件处理血浆中药物浓度-时间数据,非房室模型方法计算药代动力学参数Tmax、Cmax、AUC0→t、AUC0→∞和T1/2.结果表明,在55名健康受试者中,CYP1A2 * 1F野生型共12例(21.8％),其△Ct值为9.89±0.56;杂合型22例(40.0％),其△Ct值为0.41±0.14;纯合突变型21例(38.2％),其△Ct值为6.85±0.32.统计分析显示,CYP1A2* 1F 3种基因型组间各药代动力学参数比较皆无显著性差异(P＞0.05),但所建立的用于CYP1A2* 1F基因多态性检测的ARMS-TaqMan法具有准确、操作简单、高通量等优势,便于进一步筛查基因多态性对阿戈美拉汀药代动力学的影响,适合临床应用.本方法检测原理可用于各种单碱基突变率的检测,具有广泛的应用前景.
