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  • 幽门螺杆菌hp0529基因缺陷株的构建及其功能初步研究

    作者:唐国建;李国民;赵凯;葛锁华;蒋海燕;薛玉芹;邵世和

    目的:构建幽门螺杆菌Ⅳ型分泌系统hp0529基因缺陷株,并对其功能进行初步探讨.方法:采用同源重组原理,PCR技术扩增hp0529基因编码区两侧序列同源臂,构建含卡那霉素抗性标志的自杀质粒pBlueKM40-△hp0529;利用电穿孔法将其导入受体野生株中,通过卡那霉素筛选出hp0529基因缺陷株并经PCR及酶切方法鉴定;分别对缺陷株和野生株进行培养,观察其生长状况;并将两株细菌分别与胃上皮GES-1细胞共培养,检测hp0529基因缺陷株诱导GES-1细胞IL-8 mRNA水平的变化.结果:成功构建出幽门螺杆菌hp0529基因缺陷株;该基因敲除对细菌生长无明显影响,但对诱导GES-1细胞IL-8 mRNA表达有明显抑制作用.结论:成功构建hp0529基因缺陷株,该基因对细菌生长无明显影响,但能影响GES-1细胞IL-8 mRNA的表达.

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