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血清1,5-脱水葡糖醇的测定及在糖尿病诊断中的应用
目的:应用血清1,5-脱水葡糖醇(1,5AG)的酶动力学法,探讨其在糖尿病诊断中的应用价值.方法:应用全自动生化分析仪,采用全酶法测定健康人和糖尿病患者血清1,5AG的含量.结果:该法测定血清1,5AG精密度好,高、低值混合血清的CV分别为1.47%和1.70%;回收率分别为98.28%、101.32%和97.64%、103.36%,平均回收率为100.15%;在1,5-AG浓度为360 μmol/L内呈良好的线性;60例糖尿患者血清1,5AG(5.38～59.54 μmol/L)明显低于健康人(60.89～269.79μmol/L),P＜0.01.结论:该方法重复性好,准确度高,工作试剂在2 d内稳定,适合常规实验室开展;血清1,5AG测定有助于糖尿病的诊断和治疗过程的监控.
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以DA-64为显色剂吡喃糖氧化酶法测定血清1,5-脱水葡糖醇
目的 建立以DA-64为显色剂吡喃糖氧化酶法测定血清1,5-脱水葡糖醇.方法 通过酶法途径将葡萄糖分解为磷酸二羟丙酮和3-磷酸甘油醛后,样品中1,5-脱水葡糖醇被吡喃糖氧化酶(PROD)氧化生成1,5-脱水果糖(1,5-AF)和H2O2,H2O2在过氧化物酶的催化下与色原DA-64反应,使DA-64转变为一种绿色的产物,此产物含量与样本中1,5-脱水葡糖醇含量成正比.结果 该方法线性范围达550μmol/L,平均回收率为100.4％;批内变异系数为1.03％ ～ 2.88％,批间变异系数为1.87％ ～ 3.78％;与参考方法相关良好,回归方程及相关系数分别为Y=1.011X-1.137,r=0.9987;200例健康体检者血清1,5-AG活性参考范围为68 ～ 268μmol/L.结论 以DA-64为显色剂吡喃糖氧化酶法测定血清1,5-脱水葡糖醇,具有抗干扰能力强、灵敏度、精密度高、稳定性好等特点.
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以WST-5为色源脱氢酶法测定血清1,5-AG含量
目的:建立以WST-5为色源,脱氢酶法测定血清1,5-AG含量的新方法.方法:用ATP依赖性己糖激酶将1,5-脱水葡萄糖醇和主要干扰物葡萄糖分别转化为1,5-脱水葡萄糖醇-6-磷酸和葡萄糖-6磷酸,转化后的1,5-脱水葡萄糖醇-6-磷酸被1,5-脱水葡萄糖醇-6-磷酸脱氢酶脱氢氧化,同时使水溶性WST-5还原为有色物质,比色定量.结果:该法线性范围为0 μmol/L～ 504 μmol/L,平均回收率为99.3％；批内、批间相对标准差(RSD)分别为1.2％ ～3.3％和2.4％ ～3.9％；与参考方法相比的回归方程及相关系数分别为Y=1.009X-1.117,r=0.9984.结论:该法具有快速、简便、灵敏可靠等优点,适合临床应用.
关键词： 1 5-脱水葡糖醇 5-脱水葡糖醇-6-磷酸脱氢酶 WST-5 -
金属离子增稳的酶法终点法测定1,5-脱水葡糖醇
为建立金属离子增稳的酶法终点法测定1,5-脱水葡糖醇,通过葡萄糖激酶(GK)和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)将样品中葡萄糖(Glu)转化为6-磷酸葡萄糖内酯(G6PL),1,5-AG经吡喃糖氧化酶(PROD)作用生成1,5-脱水果糖(1,5-AF)和H2O2,后者借Trinder's系统显色定量.结果表明,该法线性范围0～250μmol/L,平均回收率为99.3％,批内变异系数(CV)和批间变异系数分别为0.0098～0.0277、0.0162～0.0368,与气相色谱-质谱法(GC-MS)比较具有良好的相关性,线性回归方程和相关系数分别为y=0.982x+2.68,r=0.9988.以金属离子为增稳剂的酶法终点法测定1,5-AG含量具有简便、灵敏、可靠的特点,适合实际推广应用.
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血清1，5-脱水葡糖醇测定对糖尿病血管损伤的诊断价值
目的：探讨血清1，5-脱水葡糖醇（1，5-AG）在糖尿病血管损伤期的诊断价值。方法将133例患者分为糖尿病组81例（包括单纯2型糖尿病25例、2型糖尿病视网膜病变44例和糖尿病肾脏病变12例）和非糖尿病组52例（包括视网膜病变28例和肾脏病变24例），测定血清葡萄糖和血清1，5-脱水葡糖醇。绘制受试者工作特征（ROC）曲线，计算血糖（Glu）和1，5-AG诊断糖尿病血管损伤的敏感性、特异性、约登指数和曲线下面积。结果糖尿病组血清Glu 水平明显高于非糖尿病组（P＜0．05），糖尿病组血清1，5-AG水平明显低于非糖尿病组（P＜0．05）。ROC 曲线分析结果显示，Glu 诊断糖尿病血管损伤的佳临界点为5．1450 mmol/L，敏感性为88．9％，特异性为90．4％，约登指数为0．7927，ROC 曲线下面积为0．9330。血清1，5-AG诊断糖尿病血管损伤的佳临界点为98．6500μmol/L，敏感性为92．6％，特异性为96．2％，约登指数为0．8875，ROC 曲线下面积为0．9800。结论血清1，5-AG对糖尿病血管损伤的诊断性能优于Glu，具有重要的临床意义。
