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顺序性化学诱导文献资料
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顺序性化学诱导促大鼠骨髓间充质干细胞向多巴胺能神经元分化
目的:研究大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)在顺序性化学诱导培养基诱导下向多巴胺(DA)能神经元细胞分化的能力.方法:通过密度梯度离心法获取大鼠骨髓中的单个核细胞,贴壁培养纯化BMSCs.以碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)、神经条件培养基(NCM)、音速波状蛋白(SHH)和成纤维细胞生长因子8(FGF8)联合对第4代BMSCs进行诱导.RT-PCR、Western blot和细胞免疫荧光染色检测DA能神经元分化过程中的标志物酪氨酸羟化酶(TH)、多巴胺转运蛋白(DAT)的表达以及转录因子Nurrl、TUJ1、AADC和VAMT的表达.结果:诱导2周后,RT-PCR结果显示Nurr1、AADC、VAMT、DAT和TH的mRNA均有表达;Western blot显示TH和TUJ1蛋白均有表达.细胞免疫荧光染色结果表明诱导2周后TH阳性细胞占(41.18±3.24)%.结论:按一定顺序给予化学诱导剂可以在体外诱导BMSCs向DA能神经元分化,并具有DA能神经元的功能特征,是临床用于治疗帕金森病这一类神经精神性疾病的理想细胞来源.
