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GCS基因的表达与急性白血病耐药的相关性探讨
目的:探讨葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)基因的表达与急性白血病患者耐药的相关性.方法:以β-actin基因为内参照物,采用RT-PCR方法分析了36例耐药/非耐药急性白血病患者血标本中GCS基因及经典的多药耐药基因(mdr1)的表达情况;并同时对标本中的BCL-2基因和BAX基因的表达水平亦进行了检测,以初步探讨GCS基因导致肿瘤细胞耐药的机制.结果:急性白血病耐药组标本的GCS基因及mdr1基因的扩增条带吸光度(A)相对比值均明显高于非耐药组(P＜0.001).耐药组BCL-2基因扩增条带A相对比值同样明显高于非耐药组(P＜0.001),而BAX基因的表达则明显低于非耐药组(P＜0.01),BCL/BAX比值在耐药及非耐药组之间差异有显著性(P＜0.01).结论:GCS基因在急性白血病细胞耐药的形成过程中可能起重要作用,且GCS促进肿瘤细胞耐药的机制可能与其通过催化神经酰胺糖基化从而影响凋亡相关基因的表达有关.
关键词： 急性白血病 耐药 葡萄糖神经酰胺合成酶基因 Bcl-2基因 bax基因 -
葡萄糖神经酰胺合成酶在人白血病细胞中的表达及其与多药耐药的关系
目的观察葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase ,GCS)基因在人白血病细胞的表达及其与肿瘤多药耐药的关系.方法采用RT-PCR方法分析耐药/非耐药白血病患者GCS基因和多药耐药(multidrug resistance,MDR)基因(mdr1)的表达水平及其两者的差异.结果白血病耐药组GCS基因扩增条带光密度相对比值明显高于非耐药组(P《0.05);白血病患者标本GCS基因扩增条带显著增强时往往伴有mdr1基因的表达,两者呈正相关(P《0.01、γ＝0.6).结论白血病多药耐药患者GCS基因的表达明显强于非耐药患者,GCS基因的表达与mdr1基因相关.提示GCS基因可能在白血病多药耐药中起着重要作用.
关键词： 白血病 多药耐药 葡萄糖神经酰胺合成酶基因 逆转录聚合酶链反应 -
GCS和MDR1与白血病细胞耐药形成的关联研究
目的 探讨葡萄糖神经酰胺合成酶基因(glucosylceramide synthase gene,GCS)和多药耐药基因(multidrug resistance 1 gene,MDR1)在人白血病多药耐药细胞株K562/A02耐药形成中的相关性,以便为逆转白血病细胞耐药提供新的思路.方法 应用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-PCR,RT-PCR)方法检测野生株K562及其耐药株K562/A02中GCS、MDR1基因的表达情况;采用RNA干扰技术(RNA interference,RNAi),将靶基因为GCS的小干扰RNA(GCS siRNA)和靶基因为MDR1的小干扰RNA(MDR1 siRNA)分别传染K562/A02细胞后,通过定性和荧光实时定量PCR的方法观察GCS及MDR1 mRNA的基因沉默现象及两者之间的交互影响.结果 KS62/A02细胞GCS和MDR1 mRNA的表达明显强于药物敏感株K562细胞;GCS siRNA组K562/A02细胞GCS和MDR1基因表达均被抑制,抑制率分别为73%(59%～82%)和67%(38%～82%);MDR1 siRNA组K562/A02细胞MDR1基因被抑制,抑制率为81%(63%～91%),GCS基因表达无改变.结论 GCS与MDR1 mRNA的表达在K562/A02细胞呈正相关,特异性的沉默GCS基因可以下调MDR1 mRNA的表达水平.
