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POLⅠ文献资料
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POLⅠ基因对人食管癌细胞放化疗敏感性的影响
目的:探讨DNA聚合酶Ⅰ(DNA polymeraseⅠ,POLⅠ)基因对人食管癌细胞ECA-109放射敏感性及对化疗药物顺铂敏感性的影响.方法:利用已经构建成功的针对POLⅠ基因的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)重组质粒,转染ECA-109细胞,通过倒置荧光显微镜观察转染效率,实时荧光定量PCR检测转染后ECA-109细胞中POLⅠ的mRNA表达水平,用细胞克隆形成实验来研究shRNA抑制POLⅠ表达后ECA-109细胞对X线放疗敏感性的变化,用MTT法检测POLⅠ基因敲除后ECA-109细胞对顺铂敏感性的变化.结果:沉默POLⅠ基因的shRNA转染ECA-109细胞后,荧光倒置显微镜下可见大量绿色荧光颗粒；实时荧光定量PCR检测发现,转染后细胞中POLⅠ的mRNA表达水平显著降低(P＜0.05)；转染后的细胞对放疗敏感性提高,对顺铂的敏感性提高(P＜0.05).结论:shRNA有效下调细胞中POLⅠ的表达,提高了肿瘤细胞对化疗药物顺铂和放疗的敏感性.
