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pCAG-3×flag-PP2A Cα文献资料
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pCAG-3×flag-PP2A Cα转基因小鼠构建及高表达系的筛选
目的:构建过表达pCAG-3×flag-PP2A Cα转基因小鼠,筛选高表达稳定遗传系,建立PP2A Cα基因相关功能研究模型动物.方法:将Flag蛋白标签序列与鼠源PP2A Cα cDNA转录本设计成融合基因,插入CAG启动子下游,构建过表达载体pCAG-3×flag-PP2A Cα.通过原核显微注射技术,将线性化pCAG-3×flag-PP2A Cα质粒注射入受精卵雄原核,构建pCAG-3×flag-PP2A Cα过表达模型小鼠,PCR筛选阳性过表达小鼠.提取阳性过表达小鼠组织总蛋白,在蛋白质水平分析转基因小鼠3×flag-PP2A Cα的表达.结果:PCR鉴定及测序结果证实,pCAG-3×flag-PP2A Cα转基因载体及过表达pCAG-3×flag-PP2A Cα转基因小鼠模型构建成功.Western blot筛选转基因高表达系小鼠.结论:筛选得到pCAG-3×flag-PP2A Cα高表达稳定遗传系小鼠.
关键词： pCAG-3×flag-PP2A Cα 转基因小鼠 过表达
