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2型糖尿病并发骨质疏松患者血清成骨因子和成脂因子的变化
目的:探讨血清成骨因子和成脂因子在2型糖尿病并发骨质疏松患者中的变化规律.方法:选择2016年4月—2017年10月盐城市第一人民医院进行双能X线骨密度(dual energy X-ray absorptiometry,DXA)检查的120例2型糖尿病患者为观察组(A组:骨密度正常的患者30例,B组:合并骨量减少的患者28例,C组:合并骨质疏松的患者33例,D组:合并骨质疏松并行强化血糖控制的患者29例),30例非糖尿病且骨密度正常的健康者为对照组,应用酶联免疫吸附法测定研究对象的碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、过氧化物酶增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)、CCAAT-增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer binding proteinα,C/EBPα)水平.结果:观察组各亚组糖化血红蛋白均高于对照组(P<0.05),DXA骨密度测定T值均低于对照组(P<0.05);观察组中D组糖化血红蛋白低于C组(P<0.05),DXA骨密度测定T值高于C组(P<0.05);观察组各亚组的ALP、Runx2水平均明显低于对照组(P<0.05),PPARγ、C/EBPα水平均高于对照组(P<0.05);观察组中D组患者ALP、Runx2水平高于C组(P<0.05),PPARγ、C/EBPα水平低于C组(P<0.05).ALP、Runx2与骨密度水平呈正相关,PPARγ、C/EBPα水平与骨密度水平呈负相关.结论:血清成骨因子和成脂因子在2型糖尿病并发骨质疏松形成及发展过程中具有重要意义,骨密度水平与成骨因子呈正相关,与成脂因子呈负相关,可为骨质疏松诊断及治疗效果评估提供参考,以提高诊断准确性.
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悬浮法与贴壁法提取脂肪组织分泌促成脂因子比较
目的 优化体外获取脂肪组织浸提液的提取方法,比较不同方法提取浸提液的成脂作用.方法 通过贴壁法和悬浮法培养脂肪组织获得浸提液,过滤、冷冻超离心浓缩浸提液,通过BCA试剂盒检测两种方式得到的浸提液分泌因子(secretory factors from adipose tissue explants,SFAE)蛋白总量及蛋白因子得率.等量蛋白成脂诱导第3代(P3)脂肪干细胞,诱导第7～13 d,显微镜下观察及进行油红染色,鉴定成脂情况.结果 贴壁法和悬浮法4次提取浸提液中蛋白含量的差异无统计学意义.但悬浮培养法4次重复实验蛋白因子得率更为稳定,贴壁法每次蛋白因子得率数据相差很大,每克脂肪组织获得分泌蛋白的量小时为7.3 mg,大可得到12.4 mg,而悬浮得到的蛋白因子几乎都趋近于8.7 mg.并且贴壁培养法与悬浮培养法相比,获取等量的SFAE需要T75培养瓶更多(10个),且需手工铺匀,贴壁后才能加入培养基,而悬浮培养法仅需悬浮培养瓶1个,加入脂肪组织后即可进行培养.两种方法得到的浸提液都具有促成脂效果,在等量蛋白诱导下的成脂效果差异无统计学意义.结论 悬浮和贴壁培养法得到的浸提液具有相同的促成脂能力,但是悬浮培养获得的浸提液更加省时省力且蛋白因子得率稳定,为后续研究和鉴定在SFAE中准确找到成脂因子奠定基础.
