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低氧对原代睾丸间质细胞和细胞系TM3、MLTC-1中核呼吸因子1与睾酮合成的影响
目的:探究低氧条件下,小鼠原代睾丸间质细胞、 小鼠睾丸间质细胞系TM3、 小鼠睾丸间质瘤细胞系MLTC-1中核呼吸因子1(nuclear respiratory factor 1,NRF-1)表达和睾酮合成的变化.方法:低氧处理3种细胞12、24、48 h,采用Western Blot、实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)、细胞免疫荧光检测NRF-1蛋白水平和mRNA水平的变化;采用酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测培养基中睾酮的含量.结果:(1)Western Blot、real-time PCR、免疫荧光实验证明,与常氧组比较,低氧处理后原代睾丸间质细胞组和MLTC-1细胞组中NRF-1蛋白水平和mRNA水平均显著下降,而TM3细胞中NRF-1 mRNA和蛋白水平显著上升;(2)ELISA实验证明,与常氧组比较,低氧处理后原代睾丸间质细胞组睾酮分泌水平明显下降,而TM3细胞组睾酮分泌水平显著上升.结论:低氧能诱发原代睾丸间质细胞、TM3细胞和MLTC-1细胞中NRF-1和睾酮水平发生明显变化,其中NRF-1变化与睾酮变化呈正相关.
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氯化汞对小鼠睾丸间质瘤mLTC-1细胞增殖和孕酮合成的影响
目的:探讨氯化汞(HgCl2)对体外培养的小鼠睾丸间质瘤细胞mLTC-1活性及孕酮合成的影响.方法:分别以10-4、10-5、10-6、10-7、10-8、10-9和10-10mol/L HgCl2对mLTC-1细胞进行染毒,24 h后噻唑蓝(MTT)法观察mLTC-1细胞活性;分别以10 kU/L人绒毛膜促性腺激素(HCG)混以0、10-8、10-7、10-6和10-5mol/L的HgCl2对mLTC-1细胞刺激2 h,放射免疫法测定mLTC-1细胞孕酮的分泌量.结果:HgCl2在10-6-10-10 mol/L剂量范围内对mLTC-1细胞活性无影响,10-5mol/L HgCl2刺激细胞增殖,10-4mol/L HgCl2抑制细胞增殖(F=5.268,P<0.001).随HgCL2剂量由0增至10-6moL/L,mLTC-1细胞孕酮分泌量逐渐下降(F=4.76,P<0.001).结论:HgCl2可以直接影响mLTC-1细胞活性及其孕酮的分泌.