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TRE17蛋白文献资料
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癌蛋白TRE17泛素化位点的初步鉴定
目的 研究癌蛋白TRE17单泛素化的位点,为深入探讨其单泛素化的机制及鉴定其泛素连接酶E3提供研究基础.方法 使用截短体逐步逼近的方法构建了一系列TRE17变异体,包括HA-TRE17(375)和HA-TRE17(303);用重叠延伸PCR方法构建了TRE17的中间缺失变异体HA-TRE17(447,Δ340-361).随后,变异体质粒被分别转染HEK293细胞,用Western blot方法鉴定各变异体及其单泛素化条带在HEK293细胞内的表达.结果 HA TRE17(447)、HA-TRE17(375)有单泛素化蛋白条带,而HA-TRE17(303)无单泛素化蛋白条带;与HA-TRE17(303)变异体一样,HA-TRE17(447,△340-361)也无单泛素化蛋白条带.结论 TRE17单泛素化位点可能位于340 361之间或附近的氨基酸残基.
