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人卵细胞ZP3蛋白文献资料
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人卵细胞ZP3蛋白在大肠杆菌中的表达与鉴定
目的 构建人卵细胞ZP3蛋白的原核重组载体并进行表达和鉴定.方法 提取人卵巢中总RNA,逆转录合成Cdna,自行设计引物,PCR扩增ZP3蛋白编码序列,PCR产物经BamHI/Nhe Ⅰ双酶切后,克隆至表达载体pET-His中,在E.coli BL21-DE3中诱导ZP3融合蛋白的表达.结果 在异丙基-β-硫代半乳糖苷(IPTG)的诱导下,重组菌高效表达出一个相对分子质量约为50 000的产物.结论 人卵细胞ZP3蛋白的全长编码序列已被克隆至ZP3蛋白融合表达载体pET-His,并在E.coli BL21-DE3中获得高表达.