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念珠菌与黑色素的相关性研究
目的：念珠菌在深部真菌感染中占第2位。文中观察临床分离念珠菌的产黑素情况。方法收集临床分离的念珠菌菌株360株，用3种产黑素培养基（咖啡酸玉米吐温、多巴和基本培养基）于35℃培养，观察培养基变色情况，并以新生隐球菌作阳性对照，通过透射电子显微镜及电子自旋共振波谱仪进一步观察。结果新生隐球菌在3种产黑培养基上均显色，第5天时，白念珠菌标准株SC5314开始变为棕褐色。360株临床念珠菌第10天时，12株在多巴培养基上变为棕褐色，15株在基本培养基上变棕褐色。透射电镜下隐球菌可看到在细胞壁的外层有一高电子密度层，白念珠菌SC5314和产色素的临床念珠菌细胞壁外层无电子致密层；白念珠菌产黑明显，波谱仪下未检测到信号。结论仅凭产色培养基观察念珠菌是否产黑色素可靠度尚有欠缺，需结合透射电镜和电子自旋共振波谱仪进一步验证。
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ESR法测定肝纤维化小鼠自由基的样品处理方法比较
目的 利用电子自旋共振(electron spin resonance,ESR)波谱仪检测肝纤维化过程中血清、血浆以及肝脏中分别产生的自由基信号,寻找检测自由基的样品前处理佳方案.方法 采用传统的四氯化碳法造模,造模1周后通过不同的处理方法,利用ESR检测小鼠肝脏、血清和血浆的自由基信号.结果 通过利用ESR技术,在小鼠肝脏、血清及血浆中均检测到了自由基信号,并且在处死小鼠后加入电子捕获剂(DMPO)所测得的自由基信号更加明显.结论 通过以上对比发现,样品加DMPO的生理盐水组测出的自由基信号相较于其他处理方法而言更为明显.
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红花水提物不同有效部位的体外 抗辐射作用及 机制研究
目的:通过对红花水提物中不同有效部位进行抗辐射效应及作用机制的初步探讨,为开发新型安全有效的辐射防护药物提供实验依据.方法:红花药材用蒸馏水60℃提取得红花水提物,采用大孔树脂HP-20洗脱分离得到水部位和30%、50%、70%、95%醇部位,采用电子自旋共振波谱仪(ESR)检测红花水提物不同有效部位清除自由基的能力;经红花水提物30%及5%醇部60位处理后,利用CCK-8法检测其对Coγ射线照射后人肝L02细胞存活率的影响;流式细胞术研究其对60Coγ 射线照射后人淋巴细胞AHH-1细胞凋亡、细胞周期及Bcl-2/Bax比率的影响.结果:ESR自由基清除实验显示红花水提物的不同有效部位均具有清除自由基能力,半数抑制浓度IC50值为1.7~79.7 mg/mL.CCK-8法检测结果显示30%及50%醇部位处理辐照后L02细胞的存活率分别为128.3%及130.9%,与照射组比较显著增加(P<0.01).流式细胞术结果显示与照射组凋亡率(24.7%±4.4%)比较,红花水提物30%及50%醇部位处理组凋亡率分别为15.3%±1.6%及15.2%±1.9%,明显降低(P<0.01).细胞周期实验结果显示与照射组AHH-1细胞G2/M期比例(45.7%±0.7%)比较,红花水提物30%及50%醇部位处理组G2/M期细胞比例分别为(42.3%±0.6%)及(36.4%±0.4%),差异有统计学意义(P<0.01),同时红花水提物30%及50%醇部位能缓解照射引起的Bcl-2/Bax比率下降(P<0.05).结论:红花水提物的6030%及50%醇洗脱部位对Coγ射线照射的L02、AHH-1细胞具有明显的辐射防护作用,其作用机制可能与清除自由基、改善细胞周期G2/M期阻滞、调控Bcl-2/Bax比率进而抑制细胞凋亡有关,可作为潜在的安全有效的抗辐射药物继续研究.
