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核酸检测在献血筛查中的应用
目的：分析单人份核酸检测方法（NAT）在无偿献血者血液筛查中的应用。方法采用 Procleix TIGRIS全自动核酸检测系统，结合血站常规的血清学检测，平行检测无偿献血者血液标本。对部分仅核酸检测阳性的献血者，特别是仅 HIV 核酸单阳性献血者和非重复反应性献血者进行追踪检测，并进行人群特性的描述性分析。结果在304103份标本中，ELISA 阴性 NAT 初始反应性标本608份（0．20％）。经鉴别实验检出 HBV －DNA 阳性标本232份，鉴别阴性复试阳性标本74份，非重复反应性阳性标本301份。追踪分析17名非重复反应性献血者，发现4人有 HBV －DNA 可鉴别的阳性。结论核酸检测技术用于献血者的常规血液筛查能进一步保障输血安全。非重复反应性的标本存在着真阳性的可能，应重视核酸检测非重复性的标本。
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核酸检测非重复反应性的HBsAg阴性血液HBV感染的确认
目的 对单个标本核酸检测呈初始反应性(Initial reactive,IR)但鉴别试验为无反应性,即所谓的核酸检测非重复反应性(NAT non-reproducible reactivity,NAT NRR),且HBsAg阴性的献血者进行HBV感染的确认.方法 采用Ultrio plus(盖立复)进行单个标本核酸检测(Individual donation nucleic acid testing,ID-NAT).应用超高速离心技术(25 0000 gx3 h)与靶向HBV基因BCP/PC、PreCore/Core、pre-S/S和S区段的高灵敏度巢式PCR检测相结合的超离体系对12mL NAT NRR血浆标本进行HBV DNA确认,以获得HBV基因序列作为HBV DNA确认的标准;同时与采用2次联检和1次鉴别试验的推荐流程的确认结果进行比较.NAT NRR标本补充电化学发光法(ECL,罗氏)的HBsAg,抗-HBc和抗-HBc检测.结果 2016年1月至2018年2月间共筛查标本77 556份,检出HBsAg-/NATNRR标本85份(0.11％),其中有79份标本进行了确认试验.超离体系确认出HBV感染标本43份,推荐流程确认出32份.配对比较显示超离体系明显优于推荐流程(McNemar test,P＜0.05):有48份(60.7％)标本至少被1种流程确认,其中27份(34.2％)标本同时被2种流程确认,16份(20.2％)标本单独被超离体系确认,超离体系未能确认的5份(6.3％)标本被推荐流程确认.HBV感染确认组和未确认组间抗-HBc+(92％和80％)和抗-HBs+(42％和55％)的占比无统计学差异,但确认组抗-HBs定量值的分布(中位数22 IU/mL,范围10-1 000 IU/mL)明显低于未确认组(P＜0.05).在HBV感染确认组中鉴别出血清学阳性型隐匿性乙型肝炎病毒感染(Occult Hepatitis B virus infection,OBI)献血者45位(94％)、血清学阴性OBI献血者1位,2位献血者因未能跟踪而疑似HBV窗口期感染.结论 加大核酸提取的血浆体积并结合以高灵敏度巢式PCR的方法能够确认60％的HBsAg-/NAT NRR标本存在HBVDNA.NAT NRR现象与病毒载量极低的OBI有关,抗-HBc检测可有助于此类HBV感染献血者的排除;HBV DNA低水平感染构成了血液安全的潜在风险,对NAT NRR献血者进行屏蔽是防范此类风险的合理措施.
