首页 > 文献资料
-
大鼠Ⅰ型肌醇三磷酸受体多种突变体的载体构建
目的 构建大鼠Ⅰ型肌醇三磷酸受体(IP3R1)多种突变体真核表达载体.方法 以pcDNA3.0-IP3R1 WT为模板,利用重组融合的方法定点突变构建3个突变体,根据点突变的位置分别命名为G2586A、I2588V、R2596A.结果 构建的3个突变体,经PCR、酶切、测序,3个位点的突变完全达到预期设计.结论 成功构建3个突变体,为进一步研究IP3R1对大鼠平滑肌细胞中胞浆内Ca2+浓度的调控作用奠定基础.
-
钙调蛋白在C型Niemann-Pick病小鼠Purkinje细胞的表达
目的:探讨钙调蛋白在C型Niemann-Pick病(NPC)小鼠Purkinje细胞的表达.方法:采用免疫组织化学和Westen Blot技术检测3种钙调蛋白Calbindin D28k、IP3R1、SERCA2b在4、6、8周龄NPC小鼠小脑部的表达,以同周龄WT(野生型)小鼠作为对照组. 结果:Calbindin D28k和IP3R1在6、8周龄时表达较WT小鼠显著下降,在4周龄时无明显减少,SERCA2b在8周龄时表达较WT小鼠显著下降.结论:3种钙调蛋白表达的下降可能导致钙失衡,参与神经元变性.
-
慢性乙醇中毒小鼠脑神经细胞IP3R1表达的变化
目的 研究慢性乙醇中毒引起小鼠脑神经细胞Ⅰ型1,4,5-三磷酸肌醇受体(IP3R1)表达的变化.方法 40只小鼠随机分为90d、180d组,各组再分为正常对照组、10％、20％、30％乙醇组,每组5只,乙醇组给予相应浓度乙醇饮用至相应时间;取各组小鼠脑组织,分别采用免疫组化和Western blot方法检测脑皮质神经细胞IP3R1表达的变化;SPSS 13.0软件对实验数据进行单因素方差分析.结果 正常IP3R1免疫组化染色物分布于神经细胞胞浆内.90d组随乙醇浓度的增加,IP3R1免疫组化阳性细胞数和阳性细胞率逐步增加,组间比较,差异显著(P＜0.05);180d组中10％、20％乙醇组阳性细胞数和阳性细胞率逐步增加,组间比较,差异显著(P＜0.05),而30％乙醇组阳性细胞数和阳性细胞率反而减少,且低于90d组的相同浓度组(P＜0.05).Western blot与免疫组化检测结果基本一致.结论 慢性乙醇中毒可引起小鼠大脑皮质神经细胞IP3R1表达增加,而高浓度(30％)、长时间(180d)乙醇使IP3R1表达降低,可能与神经细胞变性、坏死、数目减少有关.
关键词： 法医毒理学 慢性乙醇中毒 IP3R1 免疫组化 Western blot
