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c-Met siRNA对食管鳞癌细胞CE81T-4生物学特性的影响
[目的]探讨c-Met siRNA对食管鳞癌细胞CE81T-4生物学特性的影响.[方法]利用siRNA技术,采用带有荧光的慢病毒包装的c-Met siRNA稳定转染CE81T-4,并设立转染慢病毒包装的c-Met siRNA的CE81T-4为实验组,转染空慢病毒作为阴性对照,未转染CE81T-4细胞作为空白对照.于荧光倒置显微镜下观察转染效果.采用qRT-PCR检测三组细胞中c-Met mRNA的表达量,Western blot检测c-Met蛋白表达.利用MTT、划痕实验、Transwell及流式细胞术分别检测细胞的增殖、迁移、侵袭、周期及凋亡.[结果]转染c-Met siRNA后,荧光倒置显微镜下可见广泛绿色荧光表达;实验组c-Met mRNA的表达量(0.1758±0.0150)显著低于阴性对照组(0.3384±0.0346)和空白对照组(0.3759±0.0252)(P＜0.05).实验组c-Met蛋白表达显影较空白对照组及阴性对照组低;实验组细胞的增殖能力显著降低,与阴性对照组和空白对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).Transwell体外侵袭实验提示实验组的侵袭迁移个数为135±11.79,显著低于空白对照组(186±14.98)及阴性对照组(178±12.53)(P＜0.05).实验组细胞凋亡率(17.87％±1.60％)高于阴性对照组(4.93％±2.49％)及空白对照组(4.37％±1.60％)(P＜0.05).实验组G0/G1期细胞比例(48.57％±4.91％)较阴性对照组(38.13％±3.23％)和空白对照组(37.07％±2.32％)显著增多(P＜0.05).[结论]c-MetsiRNA可增加食管鳞癌细胞的凋亡率,阻滞细胞周期在G0/G1期,降低细胞增殖、迁移及侵袭能力.
