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双位酶免疫法测定NT-3cDNA/CHO细胞上清中rNT-3含量
目的:定量测定NT-3cDNA/CHO细胞培养上清中基因重组NT-3的含量.方法:利用NT-3的MoAb,建立了双位EIA法.结果:该法检测限为5.0pg/ml,批内差的变异系数为6.2%～11.4%(n=6),批间差变异系数为5.4%～8.2%(n=6).4株阳性细胞培养上清中有高水平的目的产物.结论:该EIA法简单准确;用该法成功筛选到一高表达基因重组NT-3的单克隆细胞株.
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变应性鼻炎患者外周血中神经营养因子mRNA的表达
目的 检测变应性鼻炎患者外周血中神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)、神经营养蛋白-3(NT-3)mRNA的表达水平,并分析基因表达与鼻炎病情严重程度的关系.方法 采用成组对照试验,抽提变应性鼻炎患者外周血总RNA,以正常成人为对照组.使用实时定量RT-PCR检测NGF、BDNF、NT-3 mRNA的表达水平,2-ΔΔCt法计算实验组基因表达的变化倍数.结果 相较于正常成人,变应性鼻炎患者的外周血中NGF、BDNF、NT-3 mRNA的2-ΔΔCt值依次为2.4368、4.4588、1.7818;NT-3 mRNA表达的2-ΔΔCt值随着鼻炎严重程度加重呈递增趋势.结论 相较于正常成人,变应性鼻炎患者外周血中NGF、BDNF、NT-3 mRNA的表达量上调,可能与变应性鼻炎发病有关;NT-3可作为评价变应性鼻炎严重程度的分子生物学指标.
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变应性鼻炎患者外周血中神经营养因子mRNA的表达
目的:检测变应性鼻炎(AR)患者外周血中神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)、神经营养蛋白-3(NT-3)mRNA的表达水平,分析基因表达与AR病情严重程度的关系.方法:采用成组对照试验,抽提AR患者外周血总RNA,以正常成年人为对照.使用实时定量RT-PCR检测NGF、BDNF、NT-3 mRNA的表达水平,2-△△Ct法计算AR患者基因表达的变化倍数.结果:相较于正常成年人,AR患者外周血中NGF、BDNF、NT-3 mRNA的2-△△Ct值依次为2.436 8、4.4588、1.7818;NT-3 mRNA表达的2-△△Ct值随着AR严重程度加重呈递增趋势.结论:AR患者外周血中NGF、BDNF、NT-3 mRNA的表达量上调,可能与AR的发病有关;NT-3可作为评价AR严重程度的分子生物学指标.
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变应性鼻炎患者外周血中神经营养因子mRNA的表达及与Th1/Th2免疫失衡的关系
目的:测定变应性鼻炎患者外周血中神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)、神经营养蛋白-3(NT-3)mRNA的表达水平,观察其表达与Th1/Th2免疫失衡的关系.方法:采用成组对照试验,使用实时定量RT-PCR检测外周血中NGF、BDNF、NT-3 mRNA的表达水平,21-△△Ct法计算实验组基因表达的变化倍数.ELISA检测Th2类细胞因子和Th1类细胞因子的含量.结果:相较于正常成人,变应性鼻炎患者外周血中NGF、BDNF、NT-3 mRNA的表达量是正常人的2.44、4.46和1.78倍,NT-3 mRNA的表达随着鼻炎严重程度加重呈递增趋势.变应性鼻炎患者外周血中Th2类细胞因子IL-4、IL-6、IL-10的浓度依次为2198±472、9407±703、3917±323 μg/L,明显高于正常成人(P＜0.05);而Th1类细胞因子INF-a的浓度为176±15 μg/L,明显低于正常成人(P＜0.05).NGF、NT-3的扩增水平与IL-4、IL-6、IL-10浓度呈正相关.结论:相较于正常成人,变应性鼻炎患者外周血中NGF、BDNF、NT-3 mRNA的表达量上调,NGF、NT-3可能通过Th1/Th2免疫失衡促使变应性鼻炎发病.
