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青蒿琥酯诱导人早幼粒白血病细胞HL60凋亡的线粒体机制
目的:探讨青蒿琥酯(artesunate, Art)诱导人急性早幼粒白血病细胞凋亡的线粒体机制.方法:用Art处理HL60细胞, 通过MTT比色法检测细胞增殖抑制的效果;透射电镜、DNA凝胶电泳技术观察细胞的凋亡;流式细胞术(flow cytometry,FCM)进行细胞周期分析和线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential ,MMP)水平的检测;比色法检测半胱-天冬氨酸蛋白酶3(cysteine containing aspartate, Caspase 3)活性.结果: Art呈浓度和时间依赖性的抑制HL60细胞的增殖(P<0.05).Art诱导后HL60细胞出现典型的凋亡形态学变化和生化改变,G2+M期细胞比例增高,S期减少，凋亡率上升(P<0.05),线粒体膜电位降低(P<0.05), Caspase3活性增强(P<0.05).结论:Art可能通过线粒体/半胱-天冬氨酸蛋白酶3特定途径诱导HL60细胞凋亡.
关键词： 青蒿琥酯 HL60细胞系 凋亡 线粒体膜电位 半胱-天冬氨酸蛋白酶3 -
反义硫代磷酸寡脱氧核苷酸对HL60细胞Bcl-2表达的抑制作用
目的 探讨Bc1-2反义硫代磷酸寡脱氧核苷酸(AS-PS-ODN,ASPO)是否抑制HL60细胞Bc1-2的mRNA及其蛋白的表达,以及不同浓度ASPO产生抑制作用的程度、效应发生和持续时间的差异.方法 应用免疫细胞化学染色、流式细胞仪和RT-PCR半定量法对与Bc1-2的ASPO共培养后的HL60细胞Bc1-2蛋白及mRNA表达进行检测.结果 Bc1-2的ASPO能在mRNA水平产生抑制作用,并减少Bc1-2蛋白的合成,且在培养24小时即出现效应,同时随着ASPO剂量的增加和作用时间的延长其抑制作用更显著,但72小时后出现回升现象.结论 Bc1-2的ASPO能特异抑制HL60细胞Bc1-2的mRNA和蛋白表达,且具浓度和时间的依赖性,同时又存在作用暂时性的问题.
