首页 > 文献资料
-
腺苷通过内质网应激途径诱导HepG2细胞凋亡的研究
目的 探讨腺苷(ADO)诱导人类肝癌HepG2细胞凋亡的分子机制.方法 将不同浓度的ADO(0～6 mmol·L-1)作用于HepG2细胞36 h,采用MTT法测定ADO抑制细胞增殖效应.将HepG2细胞暴露于不同浓度的ADO(0～4 mmol·L-1)作用36 h或2 mmol·L-1ADO作用不同时间(0～48 h),观察细胞核的形态学改变;观察2 mmol·L-1ADO处理12 h和24 h后细胞周期的变化;观察2 mmol·L-1ADO作用前后Caspase-3和CHOP的亚细胞定位的变化;用Western blot检测不同浓度ADO作用后HepG2细胞Caspase-3,Caspase-4,CHOP,JNK的蛋白表达变化.结果 ADO对HepG2细胞生长有明显的抑制作用,不同浓度ADO(0.5,1,2,4,6 mmol·L-1)处理HepG2细胞36 h后,与对照组相比,相对细胞存活数分别下降13.48%±0.12%, 27.92%±0.25%, 35.21%±0.42%, 51.46%±0.24%, 71.42%±0.58%,呈现剂量依赖性;不同浓度ADO作用36 h或2 mmol·L-1ADO作用不同时间(0～48 h)后,随着ADO浓度的增加或作用时间的延长,HepG2细胞核发生典型核固缩、核碎裂、核分解等凋亡形态学改变;2 mmol·L-1ADO作用12 h或24 h后,细胞周期分析出现亚二倍体峰,提示细胞发生凋亡,对照组、ADD处理12 h及24 h组细胞凋亡率分别为1.55%±0.12%、10.96%±0.07%和21.04%±0.26%;2 mmol·L-1ADO诱导Caspase-3和CHOP表达增加,并从胞质易位进入胞核内;随着ADO浓度的升高,Caspase-4,Caspase-3,CHOP的表达均升高,均呈现剂量依赖性;而JNK的表达则没有变化.结论 腺苷诱导HepG2细胞凋亡与内质网应激途径有关.
