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二萜类化合物excisanin A诱导人结肠癌SW620细胞凋亡及机制研究
目的本文研究大萼香茶菜有效单体excisanin A诱导人结肠癌SW620细胞株凋亡及其分子机制.方法 MTT法检测细胞增殖抑制作用,AnnexinV/PI双染法检测细胞早期凋亡率,Western blot法检测excisanin A对PARP、caspase-3、caspase-9剪切片断的影响,及对MAPKs通路相关蛋白,包括p-ERK、ERK、p-JNK、JNK、p-p38、p38、c-Jun表达的影响.结果 Excisanin A对结肠癌SW620细胞株生长具有明显的抑制作用,并呈浓度依赖性,其IC50 值为8.22 μmol·L-1.用8.71 μmol·L-1 excisanin A处理SW620细胞12、24、36 h,AnnexinV/PI双染检测细胞的早期凋亡,其凋亡率分别为 17.2%、20.5%、13.8%,而对照组细胞的凋亡率仅为1.9%(P<0.05).不同浓度的excisanin A作用于SW620细胞48 h后,Western blot法检测发现PARP、caspase-3,caspase-9 3种蛋白均出现断裂片断,并随着浓度的增加断裂更明显.进一步研究发现,excisanin A处理SW620细胞后,JNK、p38的磷酸化水平明显升高,c-Jun的表达亦增高.结论 Excisanin A具有明显的细胞毒作用,能诱导SW620细胞凋亡,JNK和p38途径的激活可能是其诱导凋亡的分子机制之一.
关键词: excisanin A SW620细胞 细胞凋亡 信号转导