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尼莫地平对小鼠齿状回诱导型一氧化氮合酶的表达及其活性的影响
目的探讨阻断L-型电压门控式Ca2+通道(L-VGCC)对成年动物齿状回诱导型一氧化氮合酶(Inducible nitric oxide synthase,iNOS)的表达及其活性的影响.方法通过阻塞大脑中动脉(MCAO)90 min制备局灶性脑缺血动物模型.缺血前15 min静脉单次注射尼莫地平(2.0 mg·kg-1),24 h处死动物,采用RT-PCR和Western blot的方法研究尼莫地平对齿状回iNOS 的mRNA和蛋白水平的影响,并测定iNOS酶活性和NO含量的变化.用LPS和TNF-α诱导培养的星型胶质细胞表达iNOS,同时给予尼莫地平,培养24 h后,检测各组细胞的iNOS mRNA水平和iNOS酶活性.结果与假手术组相比,MCAO后小鼠缺血侧齿状回iNOS mRNA和蛋白水平明显升高,iNOS活性增强,NOx含量增加.给予尼莫地平的动物,缺血侧齿状回无论是iNOS mRNA水平、iNOS蛋白含量,还是iNOS活性及NOx含量,与假手术组相比均显著下降.尼莫地平还可以降低培养的星型胶质细胞的mRAN水平.结论尼莫地平阻断L-VGCC,可以明显下调缺血动物的齿状回和培养细胞的iNOS表达,降低iNOS的酶活性.
关键词： 局灶性脑缺血 尼莫地平 L-型电压门控式Ca2+通道 iNOS -
尼莫地平对局灶性脑缺血诱导的成年小鼠齿状回神经元再生的影响
目的研究L-型电压门控式Ca2+ 通道(L-VGCC)阻断对局灶性脑缺血诱导成年动物海马齿状回神经元再生的影响. 方法成年♂C57/BL/6小鼠行90 min 大脑中动脉阻塞(MCAO)手术或者假手术,进行以下三个实验:①手术后48 h处死动物,经TTC染色,观察尼莫地平对梗死面积的影响;②手术后5～7 d,动物经腹腔注射5-溴脱氧尿苷(BrdU),末次注射后24 h处死动物,通过免疫组化、Fluoro-Jade染色检测尼莫地平对脑缺血诱导的齿状回细胞增殖的作用,并确定细胞增殖是否依赖于海马齿状回细胞的死亡;③动物接受如前所述的BrdU注射,并于末次注射后4 wk处死动物,采用免疫荧光双标记观察尼莫地平对脑缺血后新生细胞表型分化的影响.结果小鼠经过90 min MCAO后,齿状回新生神经元数目明显增多,这种缺血诱导的神经元再生并不依赖于齿状回神经细胞的死亡,采用尼莫地平阻断L-VGCC则抑制了缺血后的神经元再生.结论脑缺血后Ca2+经L-VGCC内流直接促进缺血诱导的神经元再生.
关键词： 局灶性脑缺血 尼莫地平 神经元再生 L-型电压门控式Ca2+通道
