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舟山眼镜蛇毒心脏毒素-13的纯化、活性及尼群地平对其作用的影响
目的从舟山眼镜蛇(Naja atra)毒分离纯化心脏毒素并观察其心脏毒性作用和探讨作用机制.方法用离子交换和凝胶过滤法从蛇毒中分离纯化心脏毒素,观察其对整体动物,离体器官和组织的作用及作用影响因素.结果从舟山眼镜蛇毒中分离出4个有心脏毒性组分,纯化其中1个定名为心脏毒素-13(Cardiotoxin-13,CTX-13),它含有60个氨基酸,分子质量7.769 ku.小鼠iv LD50为0.756 mg*kg-1.对大鼠离体心脏CTX-13可使冠脉阻力增高,心脏收缩幅度减小,停于收缩期.尼群地平(Nit)能取消CTX-13升高冠脉阻力作用,同时使CTX-13的负性肌力作用逆转为正性肌力作用.CTX-13可诱发猪离体冠脉环呈剂量依赖性收缩,其EC50为26.0 mg*L-1,Nit 0.05 μmol*L-1使其量效曲线平行右移,EC50提高到36.0 mg*L-1.但对于大鼠离体乳头肌Nit 0.83 μmol*L-1对CTX-13所致心脏毒性无明显对抗作用.在整体实验中Ni 0.3 mg*kg-1可使大鼠iv CTX-13的小致死量(MLD)从(444.7±28.5)μg*kg-1提高到(541.2±23.2)μg*kg-1.结论 CTX-13的心脏毒性作用除其直接心脏毒作用外,尚与其收缩冠脉作用有关.