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肿瘤坏死因子受体相关因子家族成员间相互作用的初步研究
目的 探讨肿瘤坏死因子受体相关因子 (TRAFs)各成员间的相互作用及各成员间的关系.方法 利用PCR技术扩增出TRAFs;构建到pDBLeu、pPC86载体上,分别形成诱饵、猎物质粒;转化,扩增酵母菌;将诱饵、猎物菌液结合酵母双杂交阵列组合(Mating)技术筛选相互作用.后用免疫共沉淀技术进行验证.结果 成功构建TRAFs的酵母双杂交载体,酵母双杂交Mating技术筛选出11对相互作用,免疫共沉淀技术验证出,TRAF1和TRAF2、TRAF6有相互作用.结论 TRAFs各成员间存在着相互联系;TRAF1通过和TRAF6的相互作用可能直接影响TRAF6介导的通路.
关键词： 酵母双杂交Mating TRAFs 相互作用 -
TRAFs与CD40分子的信号转导
CD40与其相应配体CD40L的相互作用在机体的B细胞免疫、T细胞免疫、肿瘤免疫以及移植免疫中发挥极其重要的作用,但其作用机制至今尚未阐明.CD40 mAb和CD40L可分别使CD40膜分子产生交联和配基化,进而使CD40分子多聚化,CD40分子多聚化是CD40信号转导的结构基础和始动因素.新近发现的肿瘤坏死因子受体相关因子(tumor necrosis factor receptor-associated factors,TRAFs)家族是一组连接CD40胞浆结构域与下游信号转导分子的接头蛋白(adaptors),TRAFs分子可以与CD40胞浆段不同的结构域结合,分别或共同活化相同或不同的下游分子从而介导CD40分子的不同信号通路,产生广泛而复杂的生物效应.如核转录因子KappaB(NF-κB)、丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases-MAPK)家族JNK,ERK和P38的激活等;故TRAFs是介导CD40分子信号转导的中心分子.
