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Der f 1文献资料
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粉尘螨主要变应原基因Der f1和Der f3改组的研究
目的:探索粉尘螨变应原基因Der f 1和Der f 3改组条件,以期获得粉尘螨变应原融合突变基因.方法:RT-PCR方法扩增粉尘螨变应原Der f 1和Der f 3基因,用DnaseⅠ分别酶解Der f 1和Der f 3基因10、15、20、25、30 min;酶解相同时间的Der f 1和Der f 3基因片段两两混合,采用DNA shuffling技术对粉尘螨变应原Der f 1和Der f 3基因进行重组,琼脂糖凝胶电泳检测重组子.结果:以Der f 2 F和Der f 2 R为引物在酶切10、15、20、25、30 min均可扩增出清晰条带;以Der f 1 F和Der f 1 R、Der f 1 F和Der f 2 R、Der f 2 F和Der f 1 R为引物在酶切10、15、20、25、30 min的模板中均无条带出现;而其他引物组合则在不同酶切时间的模板中均出现条带.结论:通过多种条件的组合,可获得多个粉尘螨变应原基因Der f 1和Der f 3间的融合基因,为大规模制备高效、低价的哮喘疫苗奠定了基础.
