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DAB染色法文献资料
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日本血吸虫不同发育期虫卵内抗氧化酶检测的研究
目的 检测日本血吸虫(Sj)不同发育期虫卵内抗氧化酶水平,分析其是否可作为鉴别虫卵死与活的标志物.方法 采用3,3-二甲基联苯胺盐酸盐(DAB)+H2O2底物作为抗氧化酶检测方法对完整Sj虫卵进行染色观察,并探索其染色条件.建立Sj感染后50 d和90 d的小鼠模型和吡喹酮治疗后30 d和90 d的小鼠模型.用佳染色条件对从各模型组小鼠肝肠组织分出的虫卵作检测,比较观察对未成熟卵、成熟卵、近期变性卵和远期变性卵的显色程度与其分布来评价抗氧化酶水平,分析其用于判别Sj虫卵死与活的可能性.结果 与不做染色虫卵比,DAB加入完整游离活卵中经室温震动反应30 min时,所呈深棕黄色阳性反应的反差明显;DAB对沸腾处理30 min虫卵染色,未见呈显色反应;DAB对Sj感染50 d、90 d及治后30 d和90 d的模型鼠肝肠来源虫卵染色的阳性率分别为92.34%、46.03%、13.68%和0.00 %.其阳性反应程度:未成熟虫卵普遍呈深棕黄色;成熟卵多呈深黄色,分布于毛蚴体部;近期变性卵中部分有显色;远期变性卵和卵壳均无见显色.结论 Sj活虫卵内均富含抗氧化酶成分,其水平则以未成熟卵内为高,且随着虫卵发育成熟至死亡而逐渐减低.提示Sj虫卵作抗氧化酶染色可作为虫卵死与活鉴别的标志物.
