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包膜糖蛋白G2文献资料
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汉坦病毒包膜糖蛋白G2与β3整合素的表达及相互作用
目的 研究汉坦病毒76-118株包膜糖蛋白G2与133整合素之间的相互作用.方法 根据HV76-118株M基因和β3整合素基因序列设计引物,分别以质粒M56和Hela细胞cDNA为模板通过PCR和基因重组获得带有EGFP标签的G2和带有FLAG标签的β3整合素膜外区片段融合表达质粒,并且在HEK293细胞中进行表达.将表达成功的G2与β3整合素片段进行免疫共沉淀,用Western blot检测它们之间的相互作用.结果 成功构建了G2和β3整合素膜外区各片段的融合表达质粒.将各表达质粒转染HEK293细胞进行瞬时表达,Western blot结果显示β3整合素膜外区各功能片段在细胞裂解上清中获得大量表达,而G2蛋白膜外区仅有81-140片段在细胞裂解上清中大量表达.将G281-140片段与β3整合素膜外区各功能片段进行免疫共沉淀的结果显示,仅G281-140片段和3β整合素27-133片段在细胞中以复合物存在,提示两者之间可能有直接的相互作用.结论 汉坦病毒76-118株包膜糖蛋白G281-140片段与β3整合素27-133片段在细胞中以复合物的形式存在,两者之间存在着相互作用,为β3整合素作为汉坦病毒受体提供了进一步的证据.
