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布鲁氏菌VirB8-PCR方法的建立
目的 建立VirB8-PCR方法 ,用于布鲁氏菌病的诊断和致病力因子的检测.方法 以布鲁氏菌病致病力因子--四型分泌系统中的VirB8基因为模板,设计引物,建立VirB8-PCR方法 ,优化反应条件和程序,对布鲁氏菌标准株、疫苗株和当地分离株进行检测.结果 13株布鲁氏菌标准株和6株疫苗株PCR检测结果 均为阳性;沙门氏菌、大肠杆菌、葡萄球菌、结核杆菌和链球菌均为阴性;检测11株当地分离株,9株也为阳性,2株为阴性.PCR检测特异性为100%,敏感性为153fg DNA(相当于30个菌).结论 VirB8-PCR方法 特异、敏感,能用于布鲁氏菌病的监测和致病力因子的检测.
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比较不同方法对新疆部分地区家畜布鲁氏病菌种鉴定
为评估几种方法在家畜布鲁氏菌鉴定中的作用,也为了解新疆部分地区家畜布鲁氏菌不同菌种在牛、羊间的感染率及在不同家畜间的转移情况,在南北疆3个采样点,共收集病原学组织(牛、羊流产胎儿)病料263份。经细菌分离加凝集试验得到20株可疑布鲁氏菌,对上述可疑菌株经VirB8-PCR和AMOS-PCR方法进行进一步鉴定、确定了16个布鲁氏菌株,其中9株为羊种布鲁氏菌,另7株为牛种菌。试验结果显示,采样点家畜中,羊种布鲁氏菌感染率为3.4%,而牛种布鲁氏菌感染率为2.6%。而没发现不同家畜间菌种转移。上述方法中,AMOS-PCR方法有特异性高、便利、快速等特点,在布鲁氏病病原学鉴定中推广和应用价值。